ACE2及Ang1-7对LPS诱导的大鼠ALI的影响及机制

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目的观察血管紧张素转化酶2 ( ACE2 )、血管紧张素1-7 ( Ang 1-7 )对血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)致体外大鼠肺微血管内皮细胞( PMEVC )单层通透性增高的影响以及对脂多糖( LPS)致急性肺损伤( ALI)大鼠肺组织的作用;研究ACE2对LPS性ALI大鼠PMEVC及肺组织保护作用的机制;了解Ang 1-7在ACE2对LPS性ALI大鼠PMEVC及肺组织影响机制中的作用。方法体外部分:体外成功分离、培养大鼠PMVEC ,待行成细胞单层后进行分组,分别予LPS ( 10μg / ml )、AngⅡ( 10-7 mmol / L )刺激细胞单层90 min;以及予ACE2抑制剂MLN-4760 ( 10-7 mmol / L)或Ang 1-7受体激动剂AVE0991 ( 10-6 mmol / L )预干预30 min,再予AngⅡ( 10-7 mmol / L )孵育90 min,用针头式滤器检测各组PMVEC单层通透性变化。体内部分:予大鼠尾静脉注射LPS复制建立ALI模型,用LPS ( 5 mg / kg )单独作用6 h,以及先予LPS刺激30 min,再分别予①MLN-4760 ( 10 mg / kg )、②MLN-4760 ( 10 mg / kg ) + Ang 1-7受体阻滞剂( A779,10μg / kg )、③AVE0991 ( 1 mg / kg )干预共6 h,观察肺组织湿/干重比及病理学变化。结果1.体外成功分离培养大鼠PMVEC;2. LPS、AngⅡ均可增加大鼠PMVEC单层通透系数( Kf );3. ACE2抑制剂有加剧AngⅡ致大鼠PMVEC单层Kf增高作用;4. Ang 1-7受体激动剂可抑制AngⅡ致单层Kf增高;5.建立LPS致ALI大鼠模型;6.在LPS诱导的大鼠ALI体内,ACE2抑制剂单独或协同Ang 1-7受体拮抗剂,有加剧LPS所致肺组织湿/干重比(W / D)增高和ALI病理改变的作用;7. Ang 1-7受体激动剂可抑制LPS诱导的W / D增高并改善其病理损伤改变。结论1. LPS、AngⅡ均对体外培养的大鼠PMEVC单层通透性具损伤作用;2. LPS诱导大鼠ALI,表现为肺水肿及炎症细胞浸润、透明膜形成等病理改变;3. Ang 1-7对LPS致大鼠ALI有保护作用;4. ACE2可通过促进Ang 1-7的生成,对大鼠LPS性ALI发挥保护作用。
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