分别采用有机相脂肪酶催化的不对称转酯化反应和微生物催化的不对称水解反应对DL-薄荷醇和含4对异构体的薄荷醇混合物进行了拆分,开发了化学-酶法制备L-薄荷醇的新路线。首先我们针对DL-薄荷醇和含4对薄荷醇异构体混合物的拆分体系建立了分析方法。采用气相色谱法,将CP手性柱和DB210极性柱的测试结果相结合,可以很好地测定反应体系中产物的产率和光学纯度。其次,从土壤中筛选得到了能够不对称水解DL-薄荷乙酸酯的菌株,产物的e.e.%值可达98%以上。随后对碳源、氮源种类以及培养温度等产酶条件进行了单因素考察,确定吐温-80和酵母膏为较佳的碳源和氮源,30℃为最佳产酶温度,酶活可由最初的40U/L提高到200U/L,增加幅度为400%。将优化条件下所产水解酶用于4对薄荷乙酸酯异构体的拆分,底物浓度为60mmol/L时,转化24h,产物L-薄荷醇的d.e.%值大于98%,L-薄荷乙酸酯的转化率为70%。此外,我们采用脂肪酶催化的不对称转酯化反应对薄荷醇进行了拆分。以DL-薄荷醇作为底物,对脂肪酶和溶剂进行了筛选,确定以25#酶作为催化剂,正己烷为溶剂。当DL-薄荷醇浓度为100mmol/L时,控制反应时间在40h以内,产物e.e.%值为98%,转化率为41%。然后用25#酶对含4对异构体的薄荷醇混合物进行拆分,产物中L-薄荷乙酸酯的含量为92.3%,产物的d.e.%值为85%。