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我国是传统的养蚕大国,具有丰富的桑树资源。桑树具有多种活性成分,如黄酮、生物碱、多糖等,属传统药用植物。目前桑枝资源利用率还很低,除少部分用于食用菌培养基外,每年都有大量桑枝废弃,并造成环境污染。充分开发利用桑枝资源,已受到人们的高度重视。本研究以桑枝皮为原料,利用超声波辅助酶法提取具有血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE,EC3.4.15.1)抑制活性的化合物,并利用Plackett-Burman(PB)试验设计、最陡爬坡试验和响应面法优化其提取工艺,通过离子交换树脂、葡聚糖凝胶、高效液相色谱对抑制ACE活性化合物进行分离,并对其活性组分进行了初步分析。本试验以新鲜猪肺为原料,采用硫酸铵分级沉淀、葡聚糖凝胶G-100和纤维素DE-52分离纯化后,经SDS-PAGE检测其纯度,获得ACE酶制剂纯品,最终酶的比活力为699.53U/mg,分子量为180kDa。在PB试验设计、最陡爬坡试验基础上,利用响应面分析法对桑枝皮中ACE抑制物提取工艺进行优化,确定其最佳工艺条件为:桑枝皮料液质量浓度64.6g/L,纤维素酶加入量3454.3U/g,超声波功率87W,提取时间68min。在此条件下提取桑枝皮ACE抑制剂的抑制率可达到86%,其IC50值为2.19g/L。桑枝皮提取残渣的扫描电镜结果表明,超声波辅助酶法更有利于桑枝皮活性物质的释放,超声波处理纤维素酶后,其活力提高了1.67倍;同时紫外光谱分析发现纤维素酶经超声波处理后,其紫外吸收发生了改变,可能与酶活力提高有关系。桑枝皮提取液经离子交换树脂、葡聚糖凝胶G-25、高效液相色谱分离后,收集活性较高组分。经紫外光谱分析,确定其特征吸收波长为225nm,红外光谱分析其活性成分含有苯环基团,液相-质谱联用仪分析显示,初步分离得到的物质主要有9个化合物组成,分子量范围为107~888Da,主要化合物的分子量为216Da,其次为260Da。