【摘 要】
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过敏性疾病是临床上的常见病。花粉是重要的过敏变应原之一。致敏植物的花粉飘散于空气中可诱发一系列变态反应疾病。花粉过敏已经成为季节性的流行疾病,近年来发病率呈持续
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过敏性疾病是临床上的常见病。花粉是重要的过敏变应原之一。致敏植物的花粉飘散于空气中可诱发一系列变态反应疾病。花粉过敏已经成为季节性的流行疾病,近年来发病率呈持续上升。艾蒿,蒿属菊科植物,在亚洲和欧洲均有分布,广泛分布于中国。蒿属花粉变应原性较复杂,与多种花粉变应原之间有部分交叉变应原性,且由于其高度的环境适应能力和较强的繁殖能力,野生资源分布广泛并不断扩张。艾蒿花粉过敏相关机理的研究非常迫切。目前认为,艾蒿花粉过敏源蛋白在体内水解后,分解释放的多肽被细胞表面的MHC(主要组织相容性复合体,在人体中又称HLA)捕获。捕获多肽的MHC将抗原多肽呈递给TCR(T细胞表面受体)并形成TCR/MHC/多肽复合物,导致T细胞激活,随后杀伤带有该种MHC/多肽的正常细胞,最终导致过敏发生。人体HLA具有高度的多态性。HLA-DR1*01:01和HLA-DR1*04:01是艾蒿过敏的关键性MHC。解析HLA-DR1*01:01和HLA-DR1*04:01的结构有助于从结构角度阐明艾蒿过敏的分子机理。本文采用全基因合成方法合成了HLA-DR1*01:01和HLA-DR1*04:01的编码基因,在大肠杆菌中大量表达。HLA-DR1*04:01表达不好,HLA-DR1*01:01可较好的以包涵体形式表达。因此进行了HLA-DR1*01:01包涵体的提取和复性,得到了大量的复性蛋白。经过多步、多策略纯化,最终得到性状良好的复合物蛋白。经过结晶条件筛选,得到了HLA-DR1*01:01初步晶体。后期我们将对晶体进行更深层次的筛选优化,最终得到该复合物结构信息,从而为后续的药物设计和过敏预防提供理论基础。
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