【摘 要】
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随着软电离技术的发展,特别是基质辅助激光解析(MALDI)和电喷雾(ESI)两种软电离技术的出现,使质谱分析生物大分子成为可能,将质谱的应用范围迅速扩展到生命科学的诸多研究领
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随着软电离技术的发展,特别是基质辅助激光解析(MALDI)和电喷雾(ESI)两种软电离技术的出现,使质谱分析生物大分子成为可能,将质谱的应用范围迅速扩展到生命科学的诸多研究领域,特别是成为了蛋白质组分析,医学诊断,药物分析等领域不可替代的新工具.首先,采用凝胶电泳与傅立叶变换离子回旋共振质谱(FT-ICR MS)的高分辨率和高质量精确度性能相结合的新方法,对不同肺病患者的支气管肺泡灌洗液进行了快速直接的蛋白质组分析,为肺疾病诊断学、肺病相关机理的研究以及高分辨质谱在蛋白质组分析中的应用奠定了基础.一维(1-D)和二维(2-D)凝胶电泳与高分辨FT-ICR MS相结合,对慢性支气管炎(chronic bronchitis,CB)和囊泡纤维化(cystic fibrosis,CF)患者的支气管肺泡灌洗液(BALF)中表面蛋白A和D进行了鉴定;并对表面蛋白的翻译后修饰(hydroxy-proline)进行了直接的确定;对来自于不同肺泡蛋白沉积症(PAP)患者的BALF中的特异性蛋白进行了鉴定,鉴定出表面蛋白A的两个降解片段,为研究与肺病相关的SP-A降解产物的可能降解途径提供了初步的信息.通过MALDI/ESI FT-ICR MS、园二色谱(CD)和H/D交换实验(hydrogen/deuterium exchange)对一系列人SP-C及其类似物进行了表征.证实了溶液相中FFI-SP-C和rh-SP-C的非共价二聚体的存在;研究了人SP-C在有机溶剂中的构象变化和聚集行为,为探讨肺病相关机理奠定了基础.
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