肿瘤微环境通过SCF和TLR配体增强肥大细胞促甲状腺癌生长潜能的实验研究

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探讨在肿瘤微环境下通过功能性干细胞因子(SCF)和TLR配体(LPS)增强肥大细胞对甲状腺癌组织生长的影响。方法常规培养甲状腺癌SW579细胞和骨髓来源的肥大细胞(BMMCs),制备细胞悬液,制作甲状腺癌SW579细胞裸鼠荷瘤模型,分别建立SW579细胞、BMMCs细胞及两者联合接种和瘤内注射BMMCs的模型方法,观察肥大细胞在肿瘤微环境下功能所受的影响;用功能性干细胞因子(SCF)预处理BMMCs观察肥大细胞对甲状腺癌组织生长的影响;用肿瘤细胞坏死源性分子(NTC-Ms),肿瘤组织间液(TI-Ms)模拟肿瘤微环境,分别用肿瘤坏死源性分子(NTC-Ms),肿瘤组织间液(TI-Ms)预处理的BMMCs与SW579细胞混合接种,观察肥大细胞对甲状腺癌组织生长的影响;并采用细胞趋化和抗体抑制实验检测肿瘤坏死源性分子(NTC-Ms),肿瘤组织间液(TI-Ms)中是否含有功能性干细胞因子(SCF);分别用白藜芦醇(resveratrol)或喹唑啉(QNZ)预处理的BMMCs与SW579细胞混合接种观察肥大细胞对甲状腺癌组织生长的影响;用SCF和LPS预处理的BMMCs与SW579细胞混合接种,观察肥大细胞对甲状腺癌组织生长的影响;取上述癌组织分别提取总蛋白,通过Western blot方法检测瘤体内血管内皮生长因子(VEGF)和白细胞介素-10(IL-10)的蛋白表达情况。结果BMMCs与SW579混合接种时,抑制肿瘤生长,差异有统计学意义(P<0.05);采用瘤内注射BMMCs时,则促进肿瘤生长,差异有统计学意义(P<0.05);经SCF预处理的BMMCs组瘤重大于未用SCF处理的BMMCs组,且随SCF浓度的增大,趋势作用越明显,组间比较差异无统计学意义(P﹥0.05);3个实验组分别与对照组相比,两两比较组间差异均有统计学意义(P<0.05);在混合接种模型中,NTC-Ms,TI-Ms预处理的BMMCs有促瘤生长的潜能,当NTC-Ms浓度高于20ug/ml或TI-Ms浓度等于100ug/ml时,实验组瘤重大于对照组;其中实验组1-5组间两两比较除了实验组4与5比较差异无统计学意义(P﹥0.05)外,其他组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);实验组1-5与对照组两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);细胞趋化实验检测证实NTC-Ms,TI-Ms中含有功能性SCF;resveratrol,QNZ减弱了NTC-Ms诱导MMCs促甲状腺癌生长的作用,差异有统计学意义(P<0.05);SCF和LPS可以诱导MMCs产生促瘤生长作用,有统计学意义(P<0.05)。SCF和LPS共同作用可以诱导MMCs产生促瘤生长作用,有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果表明SCF+LPS能刺激BMMCs高表达VEGF和免疫抑制因子IL-10。结论肿瘤微环境中存在功能性的SCF和LPS可以作用于骨髓来源的肥大细胞,增强其促进甲状腺癌组织生长的潜能。但其具体机制还有待于进一步研究。
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