论文部分内容阅读
菌体蛋白饲料营养丰富,适口性好,能够有效地解决人畜争粮的问题,缓解畜牧业的压力。为实现高效转化苹果渣生产菌体蛋白饲料的目标,首先通过响应面法对挤压处理苹果渣的工艺条件进行优化,在最佳挤压条件下得到挤压苹果渣。以挤压苹果渣为发酵原料,进行了发酵菌种的筛选、发酵培养基的优化。通过单因素试验研究了发酵工艺对挤压苹果渣发酵生产菌体蛋白的影响,并对最佳发酵产物进行了品质分析。主要研究内容及结果如下:1.为优化苹果渣的挤压工艺条件,以物料含水量、螺杆转速和套筒温度为试验因素,通过单因素和响应面试验得出最佳挤压工艺参数:物料含水量25%,螺杆转速163 rpm,套筒温度111℃。在此条件下,挤压苹果渣的水溶性膳食纤维含量为8.64%。对最佳挤压条件下得到的挤压苹果渣进行粒径分布分析和扫描电子显微镜分析,结果表明,与苹果渣相比,挤压苹果渣的粒径更均匀,结构更加疏松,且呈现出孔隙,以期提高微生物发酵能力。2.以发酵产物中真蛋白含量为主要考察指标,以粗蛋白含量、纤维素酶活及有效活菌数为辅助考察指标,从12种供试菌种中筛选出适宜挤压苹果渣发酵生产菌体蛋白饲料的优良菌株有五种:黑曲霉3.324(Asn)、产朊假丝酵母1314(Cau)、白地霉1315(Gec)、乳酸菌(Lac)和枯草芽孢杆菌A308(Bas1)。通过5种优势菌种的15种组合进行试验,确定了最佳混合菌种组合为Asn+Cau+Gec+Lac。基于正交试验L16(24)安排混合菌种比例试验,混合菌种按1:1:1:1的比例得到的发酵产物的真蛋白含量最高。3.以发酵产物中真蛋白含量为主要考察指标,有效活菌数和粗蛋白含量为辅助考察指标,结合Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验对发酵挤压苹果渣生产菌体蛋白饲料的培养基进行优化。通过Plackett-Burman试验从8个因素中确定了麸皮添加量、葡萄糖添加量、装料量和水料比为主要影响因素,通过最陡爬坡试验确定了主要因素进行Box-Behnken试验的中间水平为麸皮添加量16%,葡萄糖添加量8%,装料量10 g,水料比1.5。Box-Behnken试验结果表明,最佳发酵培养基条件为:麸皮添加量16.31%,葡萄糖添加量8.08%,装料量9.97 g,水料比1.56。在此条件下测得的发酵产物中真蛋白含量、有效活菌数和粗蛋白含量分别为10.42%、9.29 Log10CFU/g和18.73%。4.通过对一次接菌和分次接菌得到的发酵产物中真蛋白含量、有效活菌数和粗蛋白含量对比,分次接菌的发酵效果优于一次接菌,故选择接菌方式为分次接菌,即先接入Asn发酵24 h后,再接入其他三种混合菌。通过单因素试验得出最佳的发酵条件为:发酵温度30℃,发酵时间96 h,接种量10%,此条件下得到的发酵产物的真蛋白含量为11.11%。从发酵产物动态变化监测过程中可以看出,发酵产物中真蛋白含量和粗蛋白含量在接入Cau和Gec后迅速升高。发酵产物中的氨基酸含量显著高于苹果渣和挤压苹果渣,其大部分氨基酸含量高于豆粕和鱼粉等优质蛋白,且符合粮农组织标准,表明其可以作为一种很好的动物饲料蛋白质来源。通过固相微萃取—气质联用(SPME-GC/MS)方法测得发酵产物中挥发性成分种类丰富,有利于菌体蛋白饲料替代传统动物饲料。