本文以野油菜黄单胞菌（Xanthomonas campestris pv.campestris ACCC 10049）为出发菌株,克隆了具有表面展示活性的冰核蛋白基因（INP,ice nucleaiton protein）的N端（大小为541bp）,并与NCBI中登录的冰核基因进行了同源比对分析,其与黄单胞菌ATCC 39913菌株的冰核基因同源性高达99%。对该冰核蛋白N端（inaXN）进行了蛋白理化性质分析,二级结构和跨膜区结构预测,初步确定该冰核蛋白N端具有锚定蛋白功能。为了确定所克隆获得的冰核蛋白N端是否可以作为锚定蛋白用于表面展示,本研究选择了活性易于检测且具有一定应用前景的短小芽孢杆菌脂肪酶（Bacilluspumilus YZ02 lipase,bpL）作为乘客蛋白,与载体蛋白INP的N端相融合,构建融合基因inaXN-bpL,并克隆于超表达载体pET28a（+）,得到重组质粒pETinaXN-bpL,然后转化到宿主菌大肠杆菌（Escherichia coli）Rosetta 2（DE3）中,获得具有全细胞催化活力的重组菌株PIL3R。进一步采用细胞分级、脂肪酶活性测定、Invision^TM His-tagIn-gel stain分析和免疫荧光测定等手段证实了融合蛋白inaXN-bpL在重组菌细胞外膜的定位和成功展示。利用分光光度法检测重组菌的脂肪酶酶活,以对硝基苯酚棕榈酸酯为最适底物,测定酶活为74.6±4.5 U/mg冻干细胞,其展示水平推算结果为每个细胞表面展示有19267个脂肪酶分子;展示后的脂肪酶最适pH比自由酶的明显提高,由8.5上升到11.0;其在Tris-HC1缓冲液和40℃中温浴一周后,其酶活仍在80%以上。本文进一步选择具重金属吸附特性的猴金属硫蛋白α结构域四聚体（MT4α）作为乘客蛋白,构建inaXN-MT4α融合基因,并利用共生诱导表达启动子PnifH,构建出共生诱导条件下表达的目标重组质粒pIM-PnifH。从而为后续构建可用于土壤重金属污染修复的重组根瘤菌打下了良好基础。