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研究背景和目的:肿瘤的发生与否与机体细胞的增殖/凋亡平衡失控密切相关,当机体细胞不断增殖或凋亡能力下降时都可能诱发肿瘤。细胞凋亡(程序性细胞死亡)是细胞死亡的一种形式,涉及多个多种信号传递分子和调控基因,包括致死基因和存活基因,其中B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukemia-2 gene,Bcl-2)家族成员对细胞凋亡的调控作用尤为重要,这个家族中抗细胞凋亡成员Bc1-2和促凋亡成员BH3交叉域死亡受体激动剂(BH3-interacting domain death agonis,Bid)是最典型的基因,二者编码蛋白水平的差异衡量细胞增殖/凋亡与否。近年来有大量的文献证实Bid蛋白是颗粒酶B(granzyme B,GrB)发挥细胞杀伤作用的必需蛋白成分,而GrB是细胞毒淋巴细胞(CTL)发挥免疫毒性效应的重要因子,不仅在靶细胞内通过caspase依赖或非依赖途径发挥细胞毒性效应,抑制细胞增殖,介导靶细胞快速死亡;而且还具有其它生物学效应,即可直接或者间接活化某些Bcl-2家族成员如Bid,诱发线粒体外膜通透性增加和线粒体中凋亡因子如细胞色素C(Cytochrome C,Cyt c)的释放,致使细胞增殖能力下降而发生凋亡。同时也有文献证实CTL在处理Bcl-2高表达的人肿瘤细胞时,靶细胞能抵抗CTL介导的抗肿瘤细胞的免疫应答,而当加入Bcl-2抑制剂或用RNA干扰技术抑制肿瘤细胞中Bcl-2蛋白表达水平后,靶细胞增殖能力下降而凋亡能力明显增加,此时CTL的细胞毒性亦有显著提高。该现象提示肿瘤细胞Bcl-2/Bid表达状态对CTL介导的肿瘤细胞免疫毒性效能有明显影响,Bid的缺乏致使肿瘤细胞不断演进,而高表达水平的抗凋亡蛋白Bcl-2能使已处于凋亡过程中的肿瘤细胞彻底复苏。因此,Bid缺失或Bcl-2高表达的肿瘤细胞能顺利逃逸CTL介导的免疫毒性效应,促使肿瘤的发生和演进。胃癌是常见的胃肠道恶性肿瘤,许多患者由于早期无明显症状和缺乏初筛手段,当症状严重就诊时已经处于胃癌晚期并且预后不良。本实验目的在于揭示Bcl-2和Bid蛋白在胃切缘上皮组织和癌组织中的差异表达水平以及二者关系,探索、研究它们与胃癌临床演进和预后的关系,从而为揭露肿瘤细胞中内源性Bcl-2和Bid的表达水平可能是其逃避细胞凋亡而保持免疫自稳态的重要机制奠定基础。 方法:本研究应用免疫组织化学SP法检测42例具有全部临床资料、术前未行任何治疗、已行胃癌根治术(D2术)的患者胃切缘上皮组织和癌组织中Bcl-2和Bid蛋白表达水平,探索、研究二者在胃癌中的表达水平与胃癌演进的关系。 结果:1.Bid蛋白在42例胃切缘上皮组织和癌组织中的阳性率依次为76.19％、26.19％,有差异(P<0.05);Bid在胃癌患者的年龄和性别无关(P>0.05),与患者分化程度、浸润深度、淋巴结转移与否和TNM分期却有统计学意义(P<0.05)。2.Bcl-2在42例胃切缘上皮组织和癌组织中的阳性率依次为69.05％、21.43％,有差异(P<0.05);Bcl-2蛋白的表达与胃癌患者的年龄、性别和浸润深度无关(P>0.05),与患者分化程度、TNM分期、淋巴结转移却有统计学意义(P<0.05)。3.42例胃癌细胞标本中,Bcl-2+/Bid+表达的胃癌占9.52％(4/42),Bcl-2-/Bid-表达者占14.29％(6/42);Bcl-2+/Bid-胃癌占59.52％(25/42),Bcl-2-/Bid+胃癌占16.67％(7/42);同时Bcl-2和Bid在胃癌组织中的表达呈负相关(rs=-0.421,P<0.05)。 讨论:1.Bcl-2在胃癌组织中阳性表达水平显著上调,Bid则呈下调状态,二者与胃癌分化程度高低、TNM分期早晚和淋巴结转移与否有关,Bid表达下调还与浸润深度有关;这些预示Bcl-2蛋白的表达上调和Bid蛋白的表达下调降低了胃癌细胞的凋亡率,致使胃癌细胞逃逸细胞凋亡途径而不断增殖演进。2.胃癌组织中Bcl-2蛋白表达上调和Bid表达下调暗示着其有着极强侵袭能力,同时对判断胃癌演进及预后有一定意义。3.Bcl-2蛋白表达上调和Bid表达下调也可能是胃癌细胞自身凋亡基因在肿瘤发生时自我不断调节的结果。