两株苏云金芽胞杆菌HA和HD对黄曲条跳甲成虫的毒力比较及其生理影响分析

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:michaelhocn
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苏云金芽胞杆菌Bacillus thurigiensis(Berliner)广泛用于防治农林业害虫。本文以黄曲条跳甲Phyllotreta striolata(Fabricius)成虫为研究对象,研究苏云金芽胞杆菌HA和HD对黄曲条跳甲成虫的毒力及生理影响,为理解Bt对黄曲条跳甲成虫的作用机理,提高Bt的杀虫活性提供一定的理论依据。主要研究结果如下:1.菌株Bt-HA和Bt-HD的生物学特性分析表明两菌株的培养形态不同,生长速率不同,菌株Bt-HA的生长速率高于菌株Bt-HD,菌株Bt-HD更早进入衰亡期;扫描电镜显示菌株Bt-HA和Bt-HD的杀虫晶体蛋白分别呈菱形和矩形;SDS-PAGE电泳分析表明菌株Bt-HA有三种类型的杀虫晶体蛋白,分子量主要为65 kDa,菌株Bt-HD有五种类型的杀虫晶体蛋白,分子量主要在77 kDa左右;质粒谱图显示,两菌株都只含有单一质粒,其质粒DNA分子量相近。2.菌株Bt-HA和Bt-HD都对黄曲条跳甲成虫都具有杀虫活性,菌株Bt-HD的毒力更强。14 d内浓度为2.42×109CFU/mlBt-HA和1.19×109CFU/ml的Bt-HD对黄曲条跳甲的校正死亡率分别为84.12%和74.62%。菌株Bt-HA和Bt-HD对黄曲条跳甲的致死中浓度分别为LC50=4.01×108 CFU/ml 和 LC50=8.23×107 CFU/ml。生存曲线显示菌株Bt-HA和Bt-HD对黄曲条跳甲的寿命产生显著性影响。3.同一Bt菌株,随着Bt浓度和取食天数的增加,黄曲条跳甲取食量呈下降趋势,拒食指数增加;同一浓度下,菌株Bt-HA和Bt-HD对黄曲条跳甲的取食量和拒食指数影响不同,菌株Bt-HD拒食指数更大。取食不同处理叶片引起黄曲条跳甲GST酶反应不同,14 d内取食对照组叶片的黄曲条跳甲体内GST酶呈减少的趋势,差异显著;而取食菌株Bt-HA和Bt-HD处理叶片的黄曲条跳甲GST酶活性存在明显的上升,然后下降,趋于稳定,但响应时间具有差异性。同时,菌株Bt-HD处理叶片的黄曲条跳甲GST酶活性始终高于对照组和菌株Bt-HA处理组。4.分别用菌株Bt-HA和Bt-HD处理黄曲条跳甲成虫4 d和14 d后,解剖黄曲条跳甲成虫中肠并进行透射电镜观察,发现菌株Bt-HD处理4d后,黄曲条跳甲中肠上皮柱状细胞的微绒毛肿胀并脱落,14 d时柱状细胞的底膜也开始脱落;菌株Bt-HA处理4 d时,黄曲条跳甲成虫的中肠的微绒毛未见明显变化,14 d时微绒毛开始肿胀脱落。取食对照组叶片的黄曲条跳甲成虫的中肠在整个观测期间内均未见明显病理变化。综上所述,菌株Bt-HA和Bt-HD生物学特性差异很大,对黄曲条跳甲成虫都具有毒杀活性,显著减少黄曲条跳甲的取食量,并影响黄曲条跳甲成虫中肠的微绒毛形态,菌株Bt-HD对底膜也有一定的破坏作用,黄曲条跳甲通过增强GST酶活性对Bt进行解毒,菌株Bt-HD对黄曲条跳甲成虫的毒力更强。本研究明确了两株苏云金芽胞杆菌HA和HD对黄曲条跳甲的毒力及生理影响,有关菌株Bt-HA和Bt-HD对黄曲条跳甲成虫的作用机理有待进一步研究。
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