本研究利用含有HSA和Neo基因的乳腺特异性表达载体pBC1-HSA转染延边奶山羊耳成纤维细胞,经G418筛选后获得转基因细胞,继续培养、传代后进行PCR鉴定,检验目的基因是否成功整合。由于不同细胞的脂质体转染的最佳条件不同,为获得最高的转染效率,本试验通过质粒DNA的量、脂质体的量和细胞暴露DNA-脂质体复合物的时间三个方面来优化转染条件。最后,通过细胞转基因前后的生长曲线和核型,比较分析转基因对成纤维细胞的影响。得到试验结果如下：1、通过组织块贴壁培养法,成功获得廷边奶山羊耳部成纤维细胞。观察细胞形态及生长速度,对细胞进行生长曲线和核型分析,可知4-13代细胞生长状态良好,可用于转基因试验。2、延边奶山羊耳成纤维细胞对G418的最小致死浓度为600μg/ml,筛选时使用浓度为700μg/ml,维持筛选浓度为350μg/ml。3、适宜代数的延边奶山羊耳成纤维细胞,利用LipofectamineTM2000转染pBC1-HSA,24孔细胞培养板的最佳转染条件为质粒DNA的量为0.8μg、LipofectamineTM2000的量为2.0μl、最佳转染时间为6h,获得最高的转染效率为12.27%。4、转基因细胞传代后提取DNA,酶切后经过PCR鉴定,获得的目的基因条带与预期相符,确认人血清白蛋白基因已被成功整合到细胞染色体基因组中。