小菜蛾对有机磷杀虫剂的抗性机理研究

来源 :中国科学院动物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:arx2007
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
小菜蛾Plutellaxylostella(Lepidoptera:Plutellidae)是世界性十字花科蔬菜上的主要害虫,每年全世界的蔬菜由于其为害而造成的经济损失达10亿美元。由于小菜蛾生活史的特殊性,它对各种不同类型的杀虫剂的抗药性水平逐年上升,其抗药性的治理己成为目前非常棘手的问题,小菜蛾也成为世界上最难防治的害虫之一。本论文从中国几个小菜蛾野外种群对马拉硫磷的抗药性监测开始,研究了马拉硫磷对小菜蛾的抗药性选育、抗性种群和敏感种群之间羧酸酯酶活性的变化,利用淀粉凝胶电泳分析了小菜蛾抗性种群和敏感种群之间酯酶同工酶谱的差异以及它们之间的遗传多态性差异,最后从分子生物学方面对小菜蛾对有机磷杀虫剂的抗药性机理进行了初探,为进一步从分子水平明确其抗药性产生的真正机理奠定了重要的基础。主要研究结果和结论如下: 室内利用浸叶法,以室内敏感种群的小菜蛾作为对照,监测了中国的北京、河南、南京、武汉和福建地区小菜蛾种群对马拉硫磷的抗药性,结果发现,福建小菜蛾种群对马拉硫磷的抗性倍数为61.78倍,为高抗性水平,南京小菜蛾种群抗性水平次之,达30.64倍,这2个小菜蛾种群已不能用马拉硫磷来防治;北京和武汉小菜蛾种群的抗性倍数分别为7.85倍和3.37倍,尚属于低抗性水平;而河南小菜蛾种群对马拉硫磷还处于敏感状态,可以用马拉硫磷来适时防治。 室内采用喷雾法用马拉硫磷对敏感小菜蛾进行抗性选育,经过选育17代,抗性倍数达35.12倍,抗性上升曲线呈现指数上升的特点。对南京野外种群、抗性和敏感的小菜蛾品系的全酯酶和羧酸酯酶活性进行了测定,发现抗性种群的羧酸酯酶和全酯酶的活性相对于敏感种群都有一定程度的升高。以α-NA为底物时,抗性选育种群和南京野外种群的酯酶活性与敏感种群差异显著,而选育种群与南京自然种群的解毒酶之间活性无显著差异。以β-NA为底物时,实验所用的3个种群的酯酶之间均存在显著差异,其中以南京种群的酯酶活性最高。 利用淀粉凝胶电泳对敏感和抗性小菜蛾品系、南京和河南小菜蛾种群的酯酶同工酶的多态性及其之间的遗传差异进行了分析,结果表明2个野外小菜蛾种群的酯酶多态性较强,敏感种群的酯酶同工酶的多态性也比较强,而抗性选育种群的酯酶位点比较单一,基因型由杂合型逐渐向纯合型过渡,其中EST-4位点由于纯合子过量而显著偏离Hardy-Weinberg平衡(P=0.0079)。从遗传距离D分析,抗性选育种群在药剂的选择压力之下,与其它各种群之间的遗传差异较大。 通过分析相关昆虫种间的氨基酸序列的保守性,利用CodeHop软件设计简并引物,采用RT-PCR方法,首次从对有机磷杀虫剂产生抗性的小菜蛾品系中克隆到5个序列不同的位于羧酸酯酶基因上游的片段,大小约为420bp,已分别在GenBank上注册,序列检索号为AY044242、AY184969、AY184970、AY184971和AY184972,经BLAST比较,该基因片段与双翅目蚊虫的序列相似性达86%以上,此结果为深入研究小菜蛾抗药性的分子机理奠定了基础。 在获得羧酸酯酶基因片段的基础上设计基因特异性引物,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术试图扩增羧酸酯酶全长基因,3’端未能获得预期的条带,5’端扩增到一条单一的DNA条带,经克隆、测序之后,BLAST比较结果表明该基因是小菜蛾核糖体蛋白S13基因的全长cDNA序列,具有完整的阅读框、起始密码子和终止密码子,目前已在GenBank上登录,序列检索号为AY174891。 比较小菜蛾与其它昆虫种间的核糖体蛋白S13基因的氨基酸序列相似性,结果发现此基因在鳞翅目昆虫中的保守性很强,可能与其在生物进化中的重要功能有关。利用PHYLIPver.3.6a3构建了包括小菜蛾在内的几种昆虫和其它生物之间的系统发育树,聚类结果符合生物由低等向高等进化的历程,说明核糖体蛋白S13基因从进化上来说,既具有生物的保守性,又反映了生物进化的发展历程,可在一定程度上为生物的系统进化研究提供一种很有前景的分子标记方法。
其他文献
许多人类疾病和微生物抗药性的产生都是由基因组中单个碱基的替换、插入或缺失等基因突变引起的.因此,迫切需要发展快速、高通量基因突变检测方法来实现对基因疾病和细菌抗药
随着社会的发展,人们生活水平有很大提升,对自身居住城市的要求也越来越高.在城市化进程的快速推进下,城市内涝频发、初雨污染、水资源紧缺等问题越来越严重,阻碍了现代化城
该文在对塔克拉玛干沙漠南缘的四种荒漠植物(胡杨Populus euphratica Oliv. 柽柳 Tamarix ramosissima Ledeb. 沙拐枣Calligonum caput-medusae Schrenk.和骆驼刺Alhagi spar
随着电力电子技术在电力系统的广泛应用,越来越多的谐波注入到电网中,严重干扰了电网的电能质量。只有首先确定了电网谐波的分布与状态才能有效的治理谐波,从而减少谐波污染。电力系统谐波状态估计技术就是根据有限点上的测量值来估计整个网络的谐波状态,从而为谐波监控、抑制和治理提供有效依据。同步相量量测使得系统范围内的谐波同步测量成为了可能,也使得与传统状态估计在量测量、估计模型、求解算法以及可观性分析等相关问
对于一个企业的良好发展而言,安全管理工作实施质量的重要性不容忽视.在化工企业之中,安全管理工作的顺利开展更是会对整个企业的正常运作及相关操作人员的人身安全造成直接
市政给排水系统复杂,设计施工中影响因素众多必须统筹考虑.城市化进程须完善市政给排水管道设计工作.本文分析给排水管道布置设计、技术措施,为市政给排水管道的安全稳定运行
血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)是一种分泌型糖蛋白,可与酪氨酸激酶样受体Tie2结合,使其磷酸化,在细胞中引发一系列化学反应,从而发挥其细胞因子的功能。它在血管生成、创伤
随着工业的不断发展,在带来经济高速发展的同时,也造成了比较严重的环境污染问题,甚至威胁到了人们的身体健康.农水饮水安全问题就是当前农村在发展过程中所面临的大问题,其
电力系统暂态稳定计算是电力系统分析中基础内容之一。它关系到电力系统的各种运行方式和决策的正确性与否,从而间接影响到电力系统安全。现有的电力系统暂态稳定计算数值方法虽然已经很成熟,但是还远不能够满足电力系统分析和运行的需要。本文结合数学中的精细积分数值积分算法,提出了适用于电力系统暂态稳定计算的隐式精细积分算法。本文首先对的精细积分算法的理论进行了详细的论述,并以此为基础提出了基于多哈米尔的隐式精细
随着特高压输电工程的大规模建设,大型电力变压器类设备的运输及存储问题日益突出。变压器在工厂生产完毕后,由于运输重量等原因,一般会选择充气运输,尤其是特高压变压器,器身在充气状态下储运时间相对较长,绝缘性能易受充入气体的露点、环境温度、环境湿度等因素的影响,在实际工程建设中曾经出现过充气储运的特高压变压器器身受潮的情况。对于部分出口变压器,由于运输路途较远,运输过程中难免出现突发情况,各变压器企业基