镁离子浓度对高钙、高磷诱导的VSMC钙化的影响及机制

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目的:探讨镁离子浓度对高钙、高磷诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(RVSMC)钙化的影响,并了解镁离子能否通过抑制RVSMC向成骨样细胞分化、减少其凋亡,从而抑制RVSMC钙化。方法:体外培养RVSMC,以CaCl2,NaH2PO4, MgSO4调节培养基中钙(Ca)、磷(Pi)、镁离子(Mg2+)浓度,于培养的不同时间点用邻甲酚酞合酮法检测细胞内钙含量,Real Time PCR法检测RVSMC的cbfa-1及a-SMA mRNA的表达,MTT法检测RVSMC凋亡情况。结果:1.高钙组、高磷组培养的RVSMC在第7、10、14天时细胞内钙含量显著高于正常钙、磷组(P<0.01)。高钙组、高磷组培养第14天时,RVSMC的a-SMA mRNA表达均明显低于正常钙、磷组(P<0.05); cbfa-1mRNA水平明显高于正常钙、磷组(P<0.05)、细胞凋亡率显著高于正常钙、磷组(P<0.01)。2.不同浓度镁离子分别作用于高钙、高磷培养的RVSMC7、14天,RVSMC内钙含量随培养基中镁离子浓度的上升而下降(P<0.05),呈剂量依赖性。高镁(2.0mmol/l,3.0mmol/l)培养第14天均较第7天细胞内钙含量下降幅度明显增加。3. RVSMC培养14天时,a-SMA mRNA、cbfa-1mRNA表达水平随培养基中镁离子浓度变化而变化,高镁组(2.0mmol/l,3.0mmol/l)分别与高钙组、高磷组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.不同浓度镁离子分别作用于高钙、高磷培养的RVSMC7天,RVSMC凋亡率随镁浓度的上升而下降(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论:1.高钙、高磷培养可诱导RVSMC向成骨样细胞分化、促进其凋亡,导致RVSMC钙化。2.高镁可能通过抑制RVSMC向成骨样细胞分化,减少其凋亡,进而抑制高钙、高磷诱导的RVSMC钙化,呈时间和剂量依赖性。图9幅,表4张,参考文献43
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