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随着人民生活水平及检测质量的不断提高，前列腺癌的检出率亦逐年增高，目前在我国的发病增长率已居泌尿生殖系恶性肿瘤增长率首位。因此，人们不断尝试治疗前列腺癌的有效方法，基因治疗方法表现出较好前景。 本实验构建了前列腺特异性抗原启动子(PSAP)调控的促凋亡基因Caspase-7表达载体，并观察其对前列腺癌细胞的促凋亡作用。本实验首先提取基因组DNA，通过PCR法获得PSAP基因片段，利用基因重组方法以PSAP分别替换绿色荧光蛋白载体pIRES2-EGFP和克隆入效应型Caspase-7基因的绿色荧光蛋白载体Casp7-pIRES2-EGFP中的pCMV启动子片段，分别获得了由PSAP调控的绿色荧光蛋白载体和带有效应型Caspase-7基因的绿色荧光蛋白载体PSAP-pIRES2-EGFP质粒和PSAP-Casp7-pIRES2-EGFP质粒。 利用脂质体包裹将所构建载体分别转染至PC-3m(前列腺癌)、Hep2(喉 第四军医大学硕士学位论文癌）及MC3T3（正常成纤维）细胞中，通过荧光显微镜观察转染细胞中绿色荧光蛋白表达及细胞形态变化，免疫组化检测细胞中效应型Caspase刁蛋白的表达状况，细胞计数及MTT法观察转染不同表达载体后各类细胞生长变化。结果表明，转染PSAP（asp7巾 ＊GFP载体后，①荧光显微镜下可见在PC刁m细胞中有绿色荧光蛋白的表达，并可检测到效应型Caspase刁蛋白表达，而在HepZ及MC3T3细胞中未观测到绿色荧光，转染的前列腺癌PC—3m细胞出现凋亡细胞形态。②细胞计数及 MTT法证实转染的 PC－3m细胞生长受到抑制，活细胞数显著少于对照组，而其余细胞生长未受影响。③电镜观察结果显示转染PSAPCasp7中 上GFP后的PC习m细胞出现典型的凋亡细胞形态。 以上实验结果证实前列腺特异性抗原启动子（PSAP）可在前列腺癌细胞中特异性调控其下游Caspase刁基因的表达，并发挥其促凋亡作用，从而特异性地诱导前列腺癌细胞发生凋亡，而对正常细胞及非前列腺起源细胞不产生影响。