右旋生物素中间体内酯是合成D-生物素的关键中间体，该手性内酯的合成技术也是生产D-生物素的主要技术难点。本论文研究了利用微生物酶催化选择性内酯化反应拆分制备右旋生物素中间体内酯的全新技术路线。拆分路线如下：从实验室的微生物菌种中筛选获得了一株产高酶活性和高立体选择性内酯化活性脂肪酶的菌株，该菌株经初步鉴定为米曲霉属，并命名为米曲霉WZ007。对米曲霉WZ007的发酵培养基组成和发酵条件进行优化，确定培养基组成为：可溶性淀粉0.5％，蔗糖1.5％，橄榄油1％，蛋白胨1.5％，酵母膏0.5％，K₂HPO₄ 0.2％，MgSO₄ 0.1％，NaCl 0.5％，吐温-20 0.5％，初始pH值6.5。经优化后的发酵条件为：发酵温度28℃，装液量为80ml，摇床转速200rpm。利用优化后的产酶条件，该菌株发酵的总酶活达到51.6U／L，比原先提高了114％。初步探索了米曲霉WZ007菌体的干燥处理方法，选择了菌体在0.1M pH为7.2的巴比妥-盐酸缓冲液中冷冻干燥的方法作为实验菌体的干燥方法。研究确立了微水有机溶剂体系作为微生物酶催化选择性内酯化反应的反应体系。对微生物酶法拆分反应条件进行优化，得出较为合理的拆分工艺条件：反应溶剂二氯甲烷，反应温度25℃，体系水分添加量0.2％，反应体系水活度0.84，底物添加量2％，酶添加量1.5％，反应时间24h。在该反应条件下，酶转化率为43.5％，产物e．e．97.9％，E值212。通过对该酶催化反应动力学研究得出，米氏常数K_m=1.36mol／L，最大反应速率V_max=4.53mmol／min。最后对反应产物进行分离提纯后，成品比旋值达到60以上，已经符合工业化生产要求。