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背景腹腔镜技术诞生于20世纪初期,随着一百多年的发展,目前已成为外科学的宠儿。腹腔镜手术尤其突出的优点就是患者以较小的创伤和痛苦换取了诊断到鉴别诊断再到治疗的一条龙服务。国内从1991年开始展开腹腔镜下胆囊切除术(Laparoscopic cholecystectomy LC),现在其技术已经得到了飞速的发展,目前可应用于多个学科疾病的诊断与治疗。但随着腹腔镜手术的广泛开展,其手术术后并发症的发生也成为人们关注的对象,特别是二氧化碳气腹带来的不良效应逐步被人认识和熟知;使目前人们对二氧化碳气腹对人体循环系统、呼吸系统、消化系统等方面的影响有了一系列的研究。其中二氧化碳气腹对血管内皮细胞的影响逐步被人关注。血管内皮细胞是位于循环系统血管壁内皮下组织之间的一层单层细胞,是被覆于血管表面的机械屏障和光滑内膜,具有多种复杂的生理功能。内皮细胞受损后,会引起内皮功能紊乱,从而导致一系列生理变化。本实验通过对建立气腹大鼠后综合观察下肢静脉内皮细胞的形态学及内皮细胞损伤分子标志物:内皮素-1(ET-1)、血管性血友病因子(vWF)的改变,进一步了解二氧化碳气腹对机体内皮细胞的影响及对预防因气腹引起的循环系统改变导致一系列的并发症提供实验依据。对腹腔镜技术的发展及临床应用具有一定的科学意义。目的通过建立二氧化碳气腹大鼠模型,分别于不同时间点观察大鼠下肢静脉血管内皮细胞形态的改变及检测内皮细胞损伤分子标志物ET-1、vWF的变化。进一步了解二氧化碳气腹是否造成大鼠内皮细胞的损伤,为临床上预防腹腔镜手术术后深静脉血栓的形成提供一定的实验依据。方法80只大鼠,随即分为2组,每组40只,分别为A组(免气腹组、对照组)、B组(二氧化碳气腹组、实验组)。麻醉方法为3%戊巴比妥纳(30m1/kg)腹腔麻醉。大鼠仰卧于手术台上,腹腔内插入12号针头后,通过导管连接自制气腹装置,实验组腹腔内充入CO2气体,对照组不充入任何气体,以连接的血压计显示为12mmHg为止。1小时后解除气腹,继续常规饲养。两组随即各取10只大鼠,于术前进行尾静脉采血,另外30只大鼠分别于术后0小时、术后24小时及术后72小时随即各取10只进行尾静脉采血后处死大鼠,并分别取下肢股静脉血管为标本;每组血管标本进行光镜扫描,观察内皮细胞损伤情况,分别用放射免疫法及ELISA法测定采血标本,观察各组ET-1、vWF的改变。研究结果数据以均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS17.0软件进行统计分析,组内不同时间点之间的比较采用方差分析,两组间比较采用两独立样本均数t检验。检验水准α=0.05,以P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)内皮素-1(ET-1):ET-1在实验组及对照组大鼠术后0小时均升高,与术前相比差异有统计学意义(P<0.05),且两组之间比较差异有统计学意义(P<0.05);两组于术后24小时及术后72小时均下降至正常水平,与术前相比差异无统计学意义(P>0.05)。(2)血管性血友病因子(vWF):vWF在实验组及对照组大鼠中术后0小时均升高,与术前相比差异有统计学意义(P<0.05),且两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);两组于术后24小时均有所下降,但仍高于术前水平,与术前比较差异仍有统计学意义(P<0.05),两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);两组于术后72小时恢复至正常水平,与术前比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)实验组大鼠于术后0小时及术后24小时光镜观察血管标本均可见血管内皮细胞明显肿胀甚至脱落、基底膜断裂等情况,术后72小时可见血管内皮细胞形态逐渐恢复,仅见轻度肿胀,与术后0小时及术后24小时相比有明显改善。对照组血管标本于术后各时间点观察血管内皮细胞未见明显改变。结论1.二氧化碳气腹对血管内皮细胞的形态有损伤,且增加了内皮细胞损伤分子标志物ET-1、vWF的分泌,可能增加了静脉血栓形成的风险。2.二氧化碳气腹对内皮细胞形态及内皮损伤分子标志物ET-1、vWF的影响是短暂的,术后较短时间内即可恢复。