油茶籽粕多糖的分离纯化、理化特性及抗氧化活性研究

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油茶籽粕为油茶籽榨油后的副产物,其中含大量的多糖类物质。开发利用油茶籽粕多糖具有理论价值和实践意义。本研究以油茶籽粕为原料,优化了油茶籽粕多糖的提取及脱蛋白工艺,并对纯化后的多糖进行结构鉴定和抗氧化研究。主要研究结果如下:(1)优化了油茶籽粕多糖超声波辅助提取工艺。正交试验得出较优工艺条件为:超声时间15 min,料液比1:25,提取温度70℃,提取时间150 min。此条件下油茶籽粕粗多糖的平均提取率为16.76%。(2)优化了油茶籽粕粗多糖的脱蛋白工艺。确定木瓜蛋白酶为最佳酶种类。响应面法优化酶辅助脱蛋白的较优工艺条件为:酶添加量为3.10%,酶处理温度为57.5℃,pH=6.0,此条件下蛋白质脱除率为87.17%,多糖损失率为18.13%。(3)粗多糖经过DEAE-52纤维素阴离子交换树脂分离,得到了四种多糖组分:SCP-a(水洗)、SCP-b(0.2M NaCL)、SCP-s(0.4M NaCL)、SCP-c(0.8M NaCL)。SCP-s经葡聚糖凝胶G-200纯化得到两种多糖组分SCP-s1和SCP-s2。并对所得的SCP-a、SCP-b、SCP-c、SCP-s1和SCP-s2进行理化表征。紫外光谱扫描显示其几乎不含有核酸和蛋白质,红外光谱(FT-IR)显示其具有多糖的特征吸收峰,SCP-a、SCP-b、SCP-c、SCP-s1和SCP-s2分子量分别为8.26×10~4 Da、2.05×10~7 Da、1.44×10~7Da、2.00×10~4 Da和7.16×10~6 Da。甘露糖是其单糖组成中占比最大的一种单糖,热特性分析显示,五种多糖的热焓分别为163.2、182.4.5、149.8、186.2和112.5 J/g。X-射线衍射分析显示纯化多糖均呈现出半结晶态。(4)粗多糖(CCP)和3种纯化多糖(SCP-a、SCP-b、SCP-c)的抗氧化活性呈现剂量依赖性,四种多糖的ABTS自由基清除能力和DPPH自由基清除能力较为显著。油茶籽粕多糖抗肝组织脂质过氧化能力和羟基自由基清除能力均与铁离子螯合能力呈现出协同一致性。
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