本文选野蔷薇根(Rosa Multiflora Thunb)为原料,以野蔷薇根多糖为研究对象,较系统地研究了其提取、分离纯化的工艺条件。通过对野蔷薇根多糖的抗氧化性及抑菌功能进行了初步研究,为其在食品、医药及保健品等方面的应用奠定基础。研究结果如下:(1)考察不同提取方法对野蔷薇根多糖得率的影响。分别采用热水提取法、微波法、超声波法、超声微波法、酶解法和超声微波法酶解协同法提取野蔷薇根多糖,并设计响应曲面法优化超声-微波辅助提取和超声微波法酶解协同法提取的最佳工艺。结果表明,超声-微波辅助提取和超声微波法酶解协同法提取的得率最高。超声-微波辅助法提取野蔷薇根多糖的最佳工艺条件为:提取时间22 min,微波功率317 W,提取温度81℃,料液比32:1(mL/g),实测的多糖得率为6.10mg/g;超声微波法酶解协同法提取野蔷薇根多糖的最佳工艺条件为:纤维素酶添加量1.15%(酶活为40U/mg)、pH值5.72、提取温度81.19℃、液料比12.56:1(mL/g)。在此条件下,野蔷薇根多糖的得率为10.48mg/g。(2)筛选野蔷薇根多糖脱蛋白的最佳工艺。以蛋白去除率为主要考察指标,比较了Sevag法、TCA法(三氯乙酸法)、酶法及TCA-酶结合法对野蔷薇根多糖脱蛋白率的效果,并采用响应曲面法优化TCA法脱蛋白的最佳工艺。结果,优化后的TCA法脱蛋白最佳工艺为:TCA质量分数0.9%、体积比1:1、静置时间70min。在此条件下,蛋白去除率为75.92%,多糖损失率为22.57%。(3)探讨双氧水法脱色野蔷薇根多糖的最佳工艺条件。用双氧水法脱色野蔷薇根多糖,通过响应曲面法确定野蔷薇根多糖脱色的最佳工艺条件。双氧水法对野蔷薇根多糖的最佳脱色工艺条件为:H2O2体积分数35.0%、pH 9.0、脱色时间4.5 h,此时多糖脱色率和保留率分别为95.48%和75.17%。(4)建立野蔷薇根多糖分离纯化的方法,利用DEAE-52纤维素对野蔷薇根多糖进行分离纯化,并优化其工艺。结果,最佳分离纯化工艺参数为:离子强度为:水、0.1mol/L和0.3mol/L NaCl,DEAE-52纤维素添加量30g、流速30mL/h;经DEAE-52纤维素柱层析得到的三个组分RMTP-1、RMTP-2及RMTP-3通过冻融实验、紫外光谱鉴定为均一性的野蔷薇根多糖组分。紫外光谱分析结果表明该多糖组分不含核酸和蛋白质。(5)通过理化性质研究,野蔷薇根多糖RMTP-1和RMTP-2为不含蛋白质及酚类物质、具有多糖类化合物的通性。红外光谱分析表明,RMTP-1和RMTP-2都具有多糖的特征吸收峰。通过气质联用法(GC-MS)测定RMTP-1、RMTP-2的单糖组成:RMTP-1主要由木糖、果糖及甘露糖组成;RMTP-2主要由木糖和果糖组成。(6)采用化学方法对野蔷薇根多糖进行体外抗氧化活性测定,与VC进行了比较,并采用平板打孔法和试管稀释法对野蔷薇根多糖进行抑菌实验。实验结果表明,野蔷薇根多糖具有一定的抗氧化活性,野蔷薇根多糖的抗氧化性略低于VC,并在一定浓度范围内抗氧化活性与多糖含量呈正相关系;野蔷薇根多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、奇异变形杆菌都具有较明显的抑制作用。