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目的凝血因子Ⅻ (FⅫ),曾被称为Hageman因子,是内源性凝血途径接触激活系统系统的重要组成之一。遗传性FXII缺乏是一种罕见凝血因子缺陷症,通常为常染色体隐性遗传,部分呈现显性遗传。与其他凝血因子不同,即使是严重的遗传性FXII缺乏者,临床上并无明显出血表现,而仅表现为APTT延长。因此,目前该病在人群中的发病率并不明确。迄今为止,中国人群大规模FXII活性水平研究数据较少,临床中FXII活性减低标准也仅参照国外检测仪器或试剂提供的临界值,不能真实反映中国人群FXII水平。研究表明FXII基因中存在46C/T多态性位点,且该多态性位点与FXII活性水平相关。该位点在日本人群中的等位基因频率为0.27/0.73,而在高加索人中为0.8/0.2。纯合子46T/T FXII蛋白表达量常低于杂合子46C/T FⅫ蛋白表达量,高加索人群的FXII活性高于日本人群考虑与46C/T频率低有关。本文通过大样本横断面研究探讨中国人群FXII活性正常值范围,并对FXII活性减低者进行基因检测,有助于明确中国人群FXII活性水平,并在DNA水平认识疾病,探讨FXII缺乏症的分子发病机制。研究对象和方法1受试者招募2014年4月-8月北京协和医院健康查体人群,罹患癌症等、肝肾损害、口服避孕药物或激素替代治疗者、有静脉和/或动脉血栓性疾病史人群将排除入组,所有受试者均需签署书面知情同意书。该研究经北京协和医学院北京协和医院伦理委员会审批,编号为S-686。2方法2.1资料采集受试者入组后,收集其人口学特征及临床特征资料,涵盖性别、年龄、用药史、血栓疾病的个人史和家族史等。2.2标本采集按照如下方式收集静脉血：收集所有受试者空腹枸橼酸钠抗凝血2.7ml,在室温下2000g离心20分钟,分离乏血小板血浆于-80℃冷藏,用于APTT、FⅫ舌性分析和LA检测。剩余血细胞采用DNA提取试剂盒进行DNA收集。溶血及脂血标本弃用。2.3 FXII活性与抗原测定FⅫ活性检测采用法国STAGO公司试剂盒,于STA-R全自动凝血酶仪(STAGO公司产品)测定,所有操作步骤均严格按照试剂说明书进行。采用ELISA试剂盒(ab108835,Abcam(?)公司)进行FXII抗原检测。2.4基因检测在FⅫ活性降低者进行FXII基因检测。根据FXII基因序歹(GenBank AF538691),应用primer5软件共设计7对引物以覆盖FXII基因的所有外显子区域及其侧翼序列。在PCR扩增仪上进行扩增,产物回收纯化自备测序模板,测序结果与美国NCBI基因库所公布的FXII基因序列(GenBank AF538691)进行对比。结果1.共纳入549例(男264例,女285例)受试者,年龄范围16-79岁,中位年龄43岁。2.中国人群FXII活性正常值范围是47%-160.25%,FXII活性的平均值是91.02±29.53%,与年龄及性别无相关性。3.46T/T基因型受试者FXII活性及抗原水平均明显低于46C/T或46C/C基因型受试者。中国健康人群中46C/T等位基因频率为0.3I/0.69。4.基因测序发现2个错义突变和一个无义突变,考虑可能与FXII活性降低有关。结论该研究明确了中国人群FXII活性正常值范围是47%-160.25%,对临床中FXII缺乏患者的诊断具有重要意义。46T/T纯合子FXII活性及抗原水平均明显低于46C/T或46C/C,而中国人群T等位基因频率为0.69,可能与其总体活性水平低有关。该研究还发现了3个未报道过的突变,考虑与FXII活性降低有关,对探讨遗传性FXII活性缺乏症的分子机制有重要意义。