肿瘤严重威胁着人类健康和生命，肿瘤发生的原因非常复杂，既涉及到外界因素又与机体细胞的DNA改变、遗传特性等密切相关。研究表明，在肿瘤发病过程中，遗传因素具有重要的作用。目前正在被广泛研究的有癌基因、抑癌基因、代谢酶基因多态性。5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolatereductase，MTHFR)是一种调节有机物代谢的限速酶，它催化5，10-亚甲基四氢叶酸还原为5-亚甲基四氢叶酸。5-亚甲基四氢叶酸是叶酸在血浆中存在的主要形式，一方面它作为细胞内一碳单位的供体参与嘌呤和嘧啶的合成，并为DNARNA和蛋白质的甲基化提供甲基，从而影响正常DNA代谢；另一方面5-甲基四氢叶酸作为甲基供体，在甲硫氨酸合成酶的催化下，以维生素B12为辅酶，使血液中的同型半胱氨酸再甲基化生成甲硫氨酸，从而维持血浆同型半胱氨酸的正常水平。甲硫氨酸活化S-腺苷甲硫氨酸并作为甲基的供体参与许多代谢反应。MTHFR基因有多种突变类型，不同的基因突变类型MTHFR表现出各种不同的酶活性和热稳定性。到目前为止，已经有研究表明MTHFR基因多态性与食道贲门癌、大肠癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌的发病具有相关性，但在MTHFR基因多态性与肺癌的相关性之间的研究国外很少并且无明确的结论，国内还没有看到相关报道。本课题的主要目的： 通过对广东地区汉族肺癌患者和正常人群中MTHFRC677T和A1298C基因多态性的分布的检测，探讨MTHFR基因C677T和A1298C多态性与肺癌之间的关系，寻找肺癌的易感基因，从分子遗传学角度发现肺癌的高危人群，从而对人群进行筛选，早期对携带易感基因的人群给予维生素等干预措施，为找出个体化预防和治疗肺癌的方法提供理论基础。 材料与方法: 1.研究对象包括100例肺癌病人和100例正常对照。病人来自广州市肿瘤医院，为组织病理学诊断为肺癌的病例，根据统一标准进行分组、分型；正常对照来自广东地区汉族人，为性别、年龄与肺癌组相匹配的门诊体检正常人群。各研究对象之间无血缘关系。所有研究对象均除外严重心脑血管疾病、糖尿病、甲状腺疾病、肝肾功能不全、接受器官移植、严重营养不良等疾病。 2.人外周血白细胞DNA的提取：静脉血2ml，EDTA抗凝，采用美国Gentra公司的DNA抽提试剂盒，抽提基因组DNA。 3.MTHFR基因C677T多态性的检测：参照文献设计引物，PCR扩增MTHFRC677T基因后的产物长度为246bp，产物用Hinfl限制性内切酶酶切，用2.5％的琼脂糖凝胶电泳后，观察酶切后的产物长度。 4.MTHFR基因A1298C多态性的检测：参照文献设计引物，PCR扩增MTHFRA1298C基因后的产物长度为163bp，产物用MboⅡ限制性内切酶酶切，用2.5％的琼脂糖凝胶电泳后，观察酶切后的产物长度。 5.统计学分析：用SPSS12.0统计软件进行分析，计算MTHFRC677T和A1298C基因的基因突变率、等位基因频率、基因型频率、基因多态性与疾病的相关性及相对危险度。计数资料组间比较用x2检验，等级资料选用Kruskal-Wallis检验方法。基因型及等位基因相对风险率以比数比(OddsRatios，OR)及95％可信区间表示，显著水平使用x2检验。 结果: 1.肺癌组和对照组中MTHFRC677T各基因型的分布有显著性差异(x2=7.002，p=0.030)。进一步分析表明，CC基因型在两组之间的分布有显著性差异(x2=5.214，p=0.022)，CT基因型在两组之间的分布无显著性差异(x2=0.320，p=0.572)，TT基因型在两组之间的分布有显著性差异(x2=4.013，p=0.045)。 2.男女两种性别之间MTHFRC677T各基因型的分布无显著性差异(x2=1.328，p=0.515)。 3.MTHFR基因C677T多态性在非小细胞肺癌和小细胞肺癌中的分布无显著性差异(x2=0.118，p=0.943)。同时，在非小细胞肺癌各个病理类型之间的分布无显著性差异(x2=1.298，p=0.972)。 4.在肺癌病例各个临床分期之间MTHFRC677T多态性的分布没有显著性差异(x2=5.693，p=0.128)。 5.肺癌组和对照组中MTHFRA1298C各基因型的分布无显著性差异(x2=0.098，p=0.952)。 6.男女两种性别之间MTHFRA1298C各基因型的分布无显著性差异(x2=1.328，p=0.451)。 7.MTHFR基因A1298C多态性在非小细胞肺癌和小细胞肺癌中的分布无显著性差异(x2=0.661，p=0.753)。同时，在非小细胞肺癌各个病理类型之间的分布无显著性差异(x2=0.201，p=0.908)。 结论: 1.MTHFRC677T基因多态性分布在肺癌病例与正常人之间的分布有所不同，统计学上有显著性差异(x2=7.002，p=0.030)。 2.MTHFRC677T基因多态性分布在不同性别、不同病理类型及不同临床分期之间，统计学上无显著性差异。 3.MTHFRA1298C基因多态性分布在肺癌病例与正常人之间的分布无明显变化，统计学上无显著性差异(x2=0.098，p=0.952)。。 4.MTHFRA1298C基因多态性分布在不同性别、不同病理类型及不同临床分期之间，统计学上无显著性差异。