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目的:观察补肾活血方对卵巢早衰大鼠性激素水平及卵巢颗粒细胞凋亡相关因子的影响,探讨凋亡因子中Bax、Bcl-2及Caspase-3蛋白与POF的关系。 方法:建立卵巢早衰大鼠模型,将入组的SD大鼠均用雷公藤多苷片50mg/kg连续灌胃14天使其成模。将造模后的SD大鼠随机分为五组:即模型组、补肾活血方低剂量组、补肾活血方中剂量组、补肾活血方高剂量组及生理盐水对照组,另设空白组,共6组。各组均给予不同的干预措施,补肾活血方中药组给予不同剂量中药灌胃治疗,对照组给予生理盐水,模型组及空白组不予处理,三周后比较各组大鼠药物干预前后各指标变化。HE染色法观察各组大鼠动情周期及卵巢病理组织形态学改变;采用ELISA法检测各组大鼠血清性激素水平;免疫组化法检测颗粒细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Caspase-3表达变化。 结果: 1.性激素检测结果:雷公藤药物造模后POF大鼠性激素水平与空白组相比,模型组与对照组血清FSH水平明显升高,且P<0.05差异性显著;模型组大鼠较空白组LH水平亦有所升高,且E2水平降低,但LH及E2改变差异不显著。补肾活血方治疗后各剂量组大鼠FSH水平较模型组显著降低,且P<0.01有统计学意义;LH水平除中药高剂量组外,低、中剂量组明显低于模型组,且差异性显著;补肾活血方组大鼠E2水平与模型组比较,除中剂量组外均有明显升高,且具有统计学意义。 2.卵巢病理学检测结果:空白组大鼠卵泡生长活跃,发育良好,颗粒细胞层次丰富且生长质量较好,黄体发育完全、体积大。模型组与对照组大鼠卵巢卵泡生长停滞,卵泡闭锁明显增多,黄体发育不良,正常的卵巢颗粒细胞数量显著减少且凋亡细胞数显著增多。中药组较模型组、对照组卵巢组织有明显改善,其中低、中剂量组较为明显,卵泡闭锁较少,成熟卵泡居多,各级卵泡发育良好,黄体细胞丰富;各组比较发现,高剂量中药疗效较低剂量差,但对比模型组确有改善。 3.免疫组化检测结果:模型组大鼠卵巢颗粒细胞Bax蛋白表达较空白组明显上升,同时caspase-3表达也显著增高,且均P<0.01差异性显著,同时,Bcl-2蛋白表达有所下降,但下降幅度不明显;补肾活血方各剂量组大鼠卵巢颗粒细胞Bax及caspase-3的表达显著下降,且P<0.01有统计学意义,Bcl-2蛋白表达仅略有增强。 结论:雷公藤多苷造模后的卵巢早衰大鼠广泛存在颗粒细胞的凋亡,这可能是POF的发病机制之一;补肾活血方能够降低Bax、Caspase-3蛋白表达,并在一定程度上促进Bcl-2蛋白的表达。实验充分证明,补肾活血方可直接或间接通过减少颗粒细胞凋亡而对雷公藤多苷所致卵巢早衰起治疗作用。