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目的评估用冠状动脉灌注转染rAAV—CTLA4Ig基因的转染效率和对延长小鼠同种异体移植心脏存活时间的作用。方法实验动物随机分为治疗组、对照组和非治疗组。建立小鼠心脏移植模型，治疗组小鼠(B10，H2~b)在进行同种异体小鼠心脏移植时经冠状动脉灌注转染治疗基因rAAV-CTLA4Ig；对照组灌注报告基因rAAV-LacZ：非治疗组灌注磷酸缓冲液(PBS)。取rAAV-LacZ作为显色报告基因。其β半乳糖的表达用X-gat染色显示，测定基因转染效率和植入C3H(H2~k)体内的同种异体B10(H2~b)心脏的存活时间。结果灌注rAAV-LacZ后4-6周，30％-40％的心肌细胞X-gal染色呈强阳性；额外应用血管扩张药物并不提高转染率；转染rAAV-CTLA4Ig基因明显延长同种异体的B10移植心脏在受体C3H小鼠体内的存活时间。结论通过冠状动脉灌注，rAAV载体能成功地进行小鼠心肌的基因转染，转染rAAV-CTLA4Ig可明显抑制移植物的排斥反应。目的NF-κB在调节树突状细胞(APC)上的协同刺激分子具有重要作用，我们使用特定的反义硫代寡聚脱氧核苷酸(ODN)来特异性地抑制小鼠核因子-kappaB(NF-κB)的mRNA，导致APC协同刺激分子表达不足，延长同种异体移植心脏的存活时间。方法心脏移植术后缓释渗透泵被植入受体腹腔内，通过泵全身给予对抗NF-κB-mRNA的ODN(简称抗NF-κB-ODN)，对照组动物通过缓释泵给予错配(mismatch)ODN或不用药。结果正常受体C3H小鼠排斥同种异体移植心脏的中位存活时间(MST)是15d；14天应用12.5mg·kg·d抗NF-κB-ODN延长了同种异体移植心脏存活时间，中位存活时间是25d(P＜0.05)；而用错配ODN对照组的中位存活时间是17d，与非用药组比有显著性，P＞0.05。为了研究抗NF-κB-ODN免疫抑制作用的内在机制，在移植手术后7天收集移植物浸润细胞、脾脏T细胞、血清。的用抗NF-κB—ODN治疗受体小鼠的新鲜分离炎症浸润细胞的供体特异性细胞毒活性明显抑制，用抗NF-κB—ODN治疗的受体脾T细胞的特异性细胞毒活性比非用药组减弱。结论实验显示，抗NF-κB—ODN治疗可明显抑制同种异体移植后受体的免疫反应，使同种异体移植物的存活时间明显延长。目的抗原递呈细胞(antigen-presenting cell，APC)表达协同刺激分子，其对决定T细胞的免疫反应起重要作用。我们研究了树突状细胞(DC)转导了高亲和力的针对CD80或CD86-mRNA的反义寡聚脱氧核苷酸(简称抗CD80，CD86-mRNA-ODN)对DC表型和功能的影响。方法C57BL／10小鼠(B10，H2~b)骨髓细胞在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF)和白介素4(IL-4)的刺激下产生DC，转导抗CD80，CD86-mRNA-ODN，碱基错配的反义ODN作为阴性对照，流式细胞仪检测反义ODN对细胞表型的影响，体外混合淋巴反应和细胞毒性T淋巴细胞细胞毒效应检测DC的功能，并检测对同种异体移植的存活时间的影响。结果脂质体可以提高ODN在DC的转导；抗CD80，CD86-mRNA-ODN可明显抑制DC的CD80，CD86表达；抑制T细胞增生和供体特异性细胞毒作用，并伴有IL-2下降、IL-4上升；移植前应用转导了抗CDS0，CD86-mRNA-ODN的DC可明显延长小鼠同种异体移植心脏的存活时间。结论DC转导抗CD80，CD86-mRNA-ODN是一种可行有效的方法，转导后的DC可使T细胞反应低下并诱导外周T细胞耐受。