N-(6-((2-羟丙基)氨基)-6-氧代己基)苯甲酰胺HDAC抑制剂的设计、合成及活性评价

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组蛋白去乙酰化酶(HDACs)是当前热门的抗肿瘤药物靶点,目前已有六种组蛋白去乙酰化酶抑制剂被批准上市,该类HDAC抑制剂具有经典的三段式结构,表面识别区(Cap)、锌离子结合基团(ZBG)和链接单元(Linker)。其中异羟肟酸结构作为锌离子结合基团的HDAC抑制剂最具有代表性,但是此类化合物在体内稳定性较差,容易被代谢,且对正常细胞毒性较大。基于此,本研究以SAHA的结构作为基础,用羟丙胺酰基结构取代异羟肟酸基团作为新的锌离子结合基团,并在Cap端引入各种取代基团,设计并合成了16个N-(6-((2-羟丙基)氨基)-6-氧代己基)苯甲酰胺类化合物。并对这些化合物进行了体外细胞活性评价。具体研究内容如下:(1)目标化合物细胞增殖抑制活性评价(MTT实验),我们测定了16个化合物对三种肿瘤细胞株(HeLa、HepG-2、A549)和一种正常细胞株(WI-38)的抑制活性,结果发现,此类化合物对HeLa细胞株敏感(IC50=19.9377.06μM),且化合物a6(IC50=24.22±0.19μM)、a9(IC50=19.93±0.58μM)的活性最好;(2)HDAC酶活性评价,结果发现化合物a6,a9对HDAC具有较好的抑制活性,IC50值分别为34.3±3.25μM,22.5±2.84μM;(3)化合物a6、a9对HDAC相关蛋白表达量的影响,WB实验结果表明,a6可以使细胞Ac-tubulin表达量增加,a9即可增加Ac-H3表达量,也增加了Ac-tubulin的表达量,提示化合物a6可能是HDAC6的选择性抑制剂;(4)化合物a6,a9阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡的实验,结果表明化合物a6和a9引起HeLa细胞G0/G1期明显阻滞,且诱导HeLa细胞早期凋亡。综上所述,本论文的研究发现了一类对宫颈癌细胞具有良好抑制活性的化合物,也丰富了HDAC抑制剂化合物库,且化合物a6、a9有希望成为HDAC抑制剂的潜力化合物,用来治疗宫颈癌,具有深入研究的价值。
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