Rootletin和Cep68保持中心体连接的机制研究

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中心体是动物细胞主要的微管组织中心,在细胞器运输、细胞形态、运动、极性以及细胞分裂过程中发挥重要作用。在有丝分裂过程中,中心体之间建立两极纺锤体,维持染色体的精确分离,从而确保了基因组的稳定性。  中心体由一对中心粒组成,其周围包裹中心粒周围物质,负责微管的成核和锚定。从G1期到G2期,两个中心粒发生解离并且复制,中间由纤维状蛋白结构连接。目前已经报道的中心体连接蛋白包括C-Nap1,Rootletin,Cep68,LRCC45和Centlein等。敲低这些蛋白的表达后都会引起未成熟中心体分离又名“中心体分裂”。目前很多的研究都是集中在寻找重要的中心体连接蛋白,但是这些中心体连接蛋白在细胞间期的功能并不清楚。  本课题旨在重点研究中心体连接蛋白Rootletin和Cep68的功能。发现,E3泛素连接酶VHL复合物能够在体内和体外使Cep68发生泛素化,缺乏Rootletin会触发VHL介导Cep68通过蛋白酶体途径降解和中心体分裂,共沉默Rootletin和VHL会阻止Cep68的降解和中心体分裂。在稳定表达Cep68两种突变体(突变Cep68的泛素化位点或者删除Cep68的VHL结合区域)的细胞中,敲低Rootletin引起的中心体分裂比例显著降低。以上结果证明了中心体连接蛋白Rootletin通过部分抑制VHL介导Cep68的蛋白酶体降解而维持中心体连接。
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