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为维护竞技体育的公平和纯洁,保护运动员的身心健康,兴奋剂检测已成为所有体育比赛中不可或缺的重要环节。兴奋剂种类繁多,结构差异大,并且随着时间的推移不断有新的兴奋剂涌现。为满足兴奋剂检测的要求,兴奋剂检测实验室需要不断完善检测程序,提高检测方法的灵敏度和准确性。兴奋剂的检测技术也在不断发展,以前曾采用高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、气相色谱-质谱联用(GC/MSD)等方法进行检测。为有效解决某些药物检测过程中需要衍生化、操作复杂、检测周期长、灵敏度较差等问题,很多实验室已经采用更为先进的、灵敏度更高的气相色谱-质谱和液相色谱-质谱联用检测方法。本论文采用先进的高效液相色谱串联三重四极杆质谱,以及四极杆-静电场轨道离子阱高分辨质谱进行兴奋剂检测研究工作。本研究主要包括以下二方面:1、建立12种兴奋剂阿佐塞米(1)、丁氢氯噻嗪(2)、布林佐胺(3)、苄氢氯噻嗪(4)、氯拉扎尼(5)、氯索隆(6)、西氯他宁(7)、多佐胺(8)、喹乙唑酮(9)、芬喹唑(10)、美替克仑(11)和曲美他嗪(12)的液相色谱-质谱联用检测方法,并进行方法学验证。12种兴奋剂的检测限(LOD)在 0.01-1 Ong/mL 之间;线性范围(R2>0.99)分别为 3.0-700 ng/mL、1.5-1000 ng/mL、3.0-4000 ng/mL、3.0-1500 ng/mL、3.0-300 ng/mL、0.3-500 ng/mL、0.03-4000 ng/mL、6.0-5000 ng/mL、6.0-600 ng/mL、30-1600 ng/mL、6.0-5000 ng/mL和3.0-500 ng/mL;低、中和高三个浓度水平的日内和日间变异系数均小于15%。该方法灵敏度高、线性范围宽、准确度和重现性好,已应用于反兴奋剂中心实验室常规检测程序中。2、对阿佐塞米和曲美他嗪进行了代谢产物的研究工作。本研究采用固相萃取技术对样品进行前处理,使用四极杆-静电场轨道离子阱高分辨质谱进行分析,筛查出大鼠受试尿样中5种阿佐塞米代谢产物,其中2种为已知代谢产物,3种为本研究首次发现;检出曲美他嗪人体受试尿样中13种代谢产物,其中7种已有文献报道,6种为新代谢产物。该研究成果可拓宽阿佐塞米和曲美他嗪二种兴奋剂的检测窗口,从而发现更多的阳性案例。