目的：延长离断肢体活性保存时间，延缓组织变性，减轻离体组织的缺血损害，为平战时后方离体复合组织再植手术创造条件，进而为重要复合组织移植成活和功能恢复奠定实验基础和临床经验。方法：选健康成年Wistar大鼠（雄性）32只，（体重300—400g），大鼠由解放军总医院第一附属医院实验动物中心提供。实验一：随机选出4只，分为2组，共形成8支离断肢体模型。第一组采用UW液灌注至灌出液清亮为止。第二组为对照组，不做特殊处理。两组均置于4℃冰箱内低温保存24小时，肢体离断后每间隔6小时取组织块行病理检查。实验二：随机选出16只大鼠分为4组，每组4只，共形成32支离断肢体模型，第一组为UW液持续灌注组；第二组为HTK液持续灌注组。第三组为林格氏液+地塞米松+低分子肝素钠复合灌注液持续灌注组。第四组为生理盐水持续灌注组作为对照组。离断肢体在4℃冰箱内保存并以12ml/h进行24小时持续灌注，进行大体组织观察。收集不同时间段的灌注流出液进行ALP、ALT、GLU生化检测，并使用SPSS17.0软件进行统计学分析。同时在离体12小时、24小时取病理标本，行HE染色观察其组织结构变化，透射电镜检查观察其细胞超微结构的变化。实验三：随机选出4只大鼠，形成离断肢体模型后，采用UW液在4℃冰箱内进行间断灌注，取材及检测方法同实验二，与UW液持续灌注组在生化指标、组织结构及超微结构方面进行观察比较。实验四：选取4只大鼠，离断肢体后在低温下间断灌注无糖DMEM细胞培养液，取材及检测方法同上，与UW液间断灌注组进行生化指标、组织结构及超微结构比较。结果：实验一：在相同时间点，灌注组与对照组相比，肌纤维水肿程度轻，断裂减少，细胞发生横纹溶解减少。实验二：不同灌注液对大鼠离断肢体模型进行24小时持续灌注，灌注组与对照组在相同时间点比较，肌纤维水肿程度轻，断裂减少，细胞发生横纹溶解减少；线粒体肿胀程度轻，空泡化现象及发生破裂的数量减少，肌原纤维排列整齐，间隙增宽不明显。各灌注组与对照组在生化指标上存在统计学差异，在相同时间点，灌注组ALT、ALP含量低，GLU含量高。UW液灌注组与HTK液及复合灌注液灌注组相比较，发生肌纤维水肿程度轻，断裂减少，细胞发生横纹溶解减少；线粒体肿胀程度轻，空泡化现象及发生破裂的数量减少，肌原纤维排列整齐，间隙增宽不明显；三组之间生化指标无统计学差异。实验三：UW液通过不同灌注方式对大鼠离断肢体模型进行灌注，持续灌注组与间断灌注组相比较，病理及超微结构改变程度相当，两组之间生化指标无统计学差异。实验四：使用无糖DMEM细胞培养液对大鼠离断肢体模型进行灌注，肢体肿胀严重。UW液间断灌注组与无糖DMEM细胞培养液间断灌注组在相同时间点比较，肌纤维水肿程度轻，断裂减少，细胞发生横纹溶解减少。线粒体肿胀程度轻，空泡化现象及发生破裂的数量减少，肌原纤维排列整齐，间隙增宽不明显。两组之间生化指标存在统计学差异。在相同时间点，UW液灌注组ALT、ALP含量低，GLU含量高。结论：1、与单纯低温保存相比，对离断肢体进行灌注后低温保存效果更好。2、不同灌注液中，使用UW液灌注，可以使离断肢体得到更好的保护。3、UW液间断灌注24小时与连续灌注24小时两种灌注方法相比较，对离断肢体的保护效果相当。4、单纯灌注无糖DMEM细胞培养液，可能由于低渗等原因致离断肢体肿胀严重，后期使用时需进一步改进。