【摘 要】
:
传染性支气管炎病毒IBV(Infectious Bronchitis Virus,IBV)可引起鸡急性高度接触性呼吸道疾病。IBV具有易突变的特性,其中弱毒疫苗可能又会有散毒的风险,这些对于将来IBV疾病
论文部分内容阅读
传染性支气管炎病毒IBV(Infectious Bronchitis Virus,IBV)可引起鸡急性高度接触性呼吸道疾病。IBV具有易突变的特性,其中弱毒疫苗可能又会有散毒的风险,这些对于将来IBV疾病的净化带来很大的挑战,所以弱毒疫苗必将随着技术的发展而淘汰。因此,建立基于IBV非结构蛋白的ELISA抗体检测方法对于了解鸡群中传染性支气管炎IB(Infectious Bronchitis,IB)的流行情况、适时调整免疫程序,有效防制IB以及将来对IBV的疾病净化提供一种有效的检测方法。5b蛋白是IBV的非结构蛋白,结构和功能均保守,且不参与病毒粒子的组成,本研究针对5b蛋白制备了鸡多克隆抗体,建立了检测IBV的间接ELISA方法,同时以非结构蛋白5b作为检测抗原具有区分灭活疫苗免疫和活毒感染的潜力。本研究以pET-32a(+)为载体,构建表达5b蛋白片段的重组表达质粒,转化感受态细胞并诱导表达,以及纯化。将纯化后的5b蛋白作为免疫原,免疫4周龄SPF(Specific Pathogen Free,SPF)鸡,四免后采集血清并保存,进一步用Western Blot鉴定,结果表明获得的多抗可与5b蛋白特异结合。IBV 5b-ELISA确定的最佳反应条件:抗原包被浓度为5μg/mL,待检血清稀释倍数为1:400,酶标抗体稀释倍数为1:10 000;0.05 M pH9.6的碳酸盐缓冲液为包被液;5%脱脂奶粉为封闭液;5%脱脂奶为样品稀释液;待检血清和酶标二抗反应时间分别为60 min和45 min,底物反应时间10 min。特异性实验表明,建立的IBV5b-ELISA抗体检测方法对禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(ND)、K亚型禽白血病(ALV-K)无交叉反应。重复性实验表明,该方法的变异系数均小于5%。以非结构蛋白5b作为包被抗原,成本低。本方法具有方便快捷、敏感性高、特异性好等优点,为IBV监测、流行病学调查及对IBV的疾病净化提供了一种新的有效的检测手段。
其他文献
溺水死亡在法医病理鉴定一直是一个难点,主要是由于很大一部分的溺死者没有进行特征性尸检,因而案例较少。除此之外,国内和国际诸多学者对于溺水死亡的检验方法还存在疑议。
自卸车是工程车系列中的一种,它有减振器、后桥差速器等装置,可以前进、后退、左转、右转、料斗上升、下降。其仿真模型按 1∶30的比例制作而成。若是作为逻辑控制试验的
在星地激光通信中,携带信息的激光光束在传输链路中由于需要穿过地球大气层,受大气湍流的影响,接收端的光束会出现光强起伏、到达角起伏和光斑漂移等不利现象,对星地激光通信系统的通信质量造成严重影响。因此,研究大气湍流效应对星地光通信的影响以及相应的抗湍流干扰技术势在必行。而在诸多抗干扰技术中,信道编码技术因其具有通信传输速率快、能量利用效率高、安装成本低等优势已经在有线光通信领域内得到广泛应用。其中,L
据统计,现今世界各国的关节置换手术量与手术难度都在不断上升,为了提高关节置换手术的手术效果,关节置换手术机器人被引入手术中辅助医生操作,并且成为当前机器人与医疗领域
<正>数字中国是国民经济与社会信息化发展的核心内容,数字中国建设也是国家信息资源建设的重要目标。基于数字城市建设理论的环境地理信息基础数据框架,是数字城市建设的核心
量子纠缠作为量子信息学中的一种十分重要的物理资源,在许多量子信息理论的应用过程中发挥着关键作用。态叠加原理作为量子力学的基础,在量子信息应用中扮演着重要角色,态叠
<正>《电力中长期交易基本规则(暂行)》印发以来,各地开展了品种多样的中长期交易,云南是全国首个开展日前电量交易的省份,昆明电力交易中心于2016年设计并开展了日前电量增
<正>"有希望是件好事情,也许是世间最好的事情,好的东西从不会逝去。"一部讲述希望与救赎的经典影片——《肖生克的救赎》于3月13日起在中国台湾的部分影院重映,以纪念该片上
近年来,经济的高速增长、产业模式的迅速蜕变以及高新科技的大幅推广,人力资源在建筑行业尤其是建筑施工类行业的配置开始出现诸多问题:技术型人才供不应求、管理型人才流动性强、建筑施工工人难寻等。2020年新冠肺炎爆发,一定程度上影响着社会人力资源的合理配置。面对经济发展大形势和新冠肺炎类突发事件的冲击,要求建筑企业必须在人力资源开发和管理上下功夫,努力向人力资源管理要效益,以促进企业经济效益的进一步提升
经过多年的勘探开发,地震勘探的目标逐渐由简单的浅层构造型油气藏转向深层隐蔽型油气藏,所要求的地震勘探精度也越来越高,目前绝大部分高效的地震勘探技术依旧是基于地下介质是弹性各项同性这一基本假设,但是,实践表明地下介质并非完全弹性,存在着诸多衰减机制,而且由于介质本身的性质以及分布的不均匀性,介质组成的多样性,使得地下介质还存在着广泛的各向异性性质,因而高精度的反演成像就要求有更能准确真实的反应地下介