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背景脑损伤后损伤区域边缘形成的胶质瘢痕在前期对于防止炎症的蔓延起到积极作用,然而后期形成的致密“围栏”成为了阻碍轴突再生的物理和化学屏障,使神经轴突不能穿越损伤区域,是神经功能恢复不良的原因之一。如何减少损伤后期胶质瘢痕的形成而有益于轴突再生是面临的主要问题。胶质瘢痕主要由反应性星形胶质细胞、脑膜成纤维细胞和细胞外基质组成,细胞外基质主要是硫酸软骨素蛋白聚糖(chondroitin sulfate proteoglycan,CSPGs)。在正常的脑组织中并不存在脑膜成纤维细胞,其只有在脑损伤发生后才向损伤区域迁移并与反应性星形胶质细胞构成胶质瘢痕,但是脑膜成纤维细胞向损伤区域迁移的目的及机制尚未清楚。CSPGs作为主要的细胞外基质抑制了轴突再生,且可能对神经干细胞的迁移产生抑制作用,但对于其是否影响了脑膜成纤维细胞向损伤区域迁移未有报道。P38 MAPK信号通路与细胞的的迁移相关,以往研究发现p38表达增加可能促进了成纤维瘤的迁移。损伤区域存在的CSPGs是否对脑膜成纤维细胞的趋化迁移具有作用以及其是否涉及p38通路激活是我们想要探讨的问题。对脑膜成纤维细胞向损伤区域迁移的目的及潜在的机制研究可促进对胶质瘢痕形成及其病理生理意义的探索。目的探讨脑损伤发生后脑膜成纤维细胞向损伤区域迁移的目的及所涉及的机制。方法提取刚出生大鼠乳鼠脑星形胶质细胞(Astrocyte,A)及脑膜成纤维细胞进行原代培养,行荧光染色鉴定细胞身份。通过体外氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)处理星形胶质细胞(AOGD)之后加入脑膜成纤维细胞共培养体系(A OGD+F),行荧光染色、qPCR鉴定GFAP表达情况,qPCR、western blot检测胶质瘢痕相关蛋白CSPGs表达情况,比较反应性星形胶质细胞活化程度。将脑膜成纤维细胞与以下分组:星形胶质细胞OGD处理组,或加入ChABC处理组与control组进行transwell共培养观察迁移情况。将以上分组的上清液与脑膜成纤维细胞共培养收集蛋白行western blot检测p38及磷酸化p38表达情况,进一步加入p38 MAPK通路抑制剂SB203580观察脑膜成纤维细胞迁移变化,p38 MAPK信号通路下游蛋白cofilin表达变化。结果1.星形胶质细胞在OGD后转变为反应性星形胶质细胞,表现为高表达GFAP,以及细胞轴突变粗且表达CSPGs升高;脑膜成纤维细胞与反应性星形胶质细胞共培养减少了后者GFAP以及CSPGs的表达。2.脑膜成纤维细胞在AOGD组迁移数量明显高于AOGD+ChABC组与A无OGD组(P<0.05)。而p38的表达在各组间比较无差异,磷酸化p38的表达在AOGD组明显增高(P<0.05),其余两组无明显变化。3.加入p38 MAPK通路抑制剂SB203580后脑膜成纤维细胞迁移的数量相较于AOGD组明显减少(P<0.05),但与A无OGD组无明显差别。p38 MAPK信号通路下游蛋白cofilin的表达,脑膜成纤维细胞在AOGD上清液处理组明显增加,而当添加ChABC消化CSPGs后或SB203580(p38通路抑制剂)后明显降低。结论1.在体外OGD处理后可诱导星形胶质细胞转变为反应性星形胶质细胞,并高表达CSPGs。脑膜成纤维细胞的加入减轻了星形胶质细胞的活化程度。2.反应性星形胶质细胞促进脑膜成纤维细胞的迁移是通过CSPGs作用的,而调控脑膜成纤维细胞的迁移则可能是通过p38 MAPK信号通路完成的。3.脑膜成纤维细胞迁移的增加与细胞骨架蛋白cofilin激活有关。