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目的:胰腺癌化疗耐药是胰腺癌患者预后差的主要原因,而代谢的调控异常为导致化疗耐药的重要因素。寻找调控胰腺癌化疗耐药核心靶点,明确其作用机制,对改善胰腺癌患者预后具有重要意义。项目组利用能真实反映患者化疗敏感性的鼠人源胰腺癌移植瘤模型(PDTX模型),对化疗耐药组/敏感组进行高通量转录组测序,筛选出耐药相关的SDF2L1基因。既往研究表明基质细胞衍生因子2样蛋白1(SDF2L1)在维持内质网稳定中发挥重要作用,且癌细胞可以通过上调SDF2L1抑制内质网应激(ER-stress)产生的凋亡,同时诱导癌细胞产生耐药相关的上皮间充质细胞转化(EMT)。因此,我们推测SDF2L1-ER stress-EMT可能为胰腺癌化疗耐药的机制之一。本课题拟通过体内/外实验,研究靶向抑制SDF2L1表达后,对胰腺癌细胞侵袭转移,化疗耐药的影响。本课题有望为胰腺癌化疗耐药提供新的治疗靶点。方法:基于人源胰腺癌细胞移植瘤模型的数据,将化疗耐药组/敏感组分别进行高通量转录组测序,在对数据进行分析后,发现相较于化疗敏感的胰腺癌细胞,在胰腺癌化疗耐药细胞中,SDF2L1呈显著高表达。本实验选取SDF2L1表达量适中的标准胰腺癌细胞株(PanC-1,BxPC-3),构建敲低SDF2L1的胰腺癌细胞株系。观察在敲低SDF2L1后,对胰腺癌细胞株的生物学行为的影响(侵袭,转移,增殖等),同时观察在吉西他滨处理条件下,按时间梯度浓度检测敲低细胞与对照细胞的生存情况。同时基于TCGA数据库,运用生物信息学分析SDF2L1基因在胰腺癌中可能的信号通路联系。结果:1、SDF2L1在PDTX模型的吉西他滨耐药组中高表达。对PDTX模型中15例吉西他滨敏感组和13例耐药组细胞进行转录组测序发现,SDF2L1在耐药组中明显高表达。2、敲低SDF2L1可遏制胰腺癌细胞增殖和化疗耐药。采用siRNA敲低SDF2L1,发现胰腺癌的增殖受到抑制,吉西他滨对肿瘤细胞的抑制率上升,提示SDF2L1可促进肿瘤增殖,降低细胞对吉西他滨的敏感性。3、吉西他滨可诱导SDF2L1表达上调。在胰腺癌细胞株的培养基中加入不同浓度的吉西他滨,模拟应激刺激,收集活细胞,提取总RNA后采用荧光定量PCR检测,发现加入吉西他滨后细胞内SDF2L1表达水平显著上升。结论:SDF2L1基因在胰腺癌耐药细胞中存在差异表达,敲低SDF2L1可抑制胰腺癌细胞的增殖,同时使得吉西他滨对肿瘤细胞的抑制率上升。吉西他滨亦可诱导SDF2L1表达上调。说明SDF2L1为潜在的影响胰腺癌化疗耐药的因素之一。