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目的: 研究鞭毛内运输蛋白25(Ift25)对小鼠精子鞭毛的形成的影响以及对雄性生育的作用。 方法: 1.Ift25flox/flox的雌性小鼠与Stra8-iCre雄鼠杂交得到stra8-iCre;Ift25flox/-; 2.RT-PCR检测IFT25基因在小鼠不同组织中mRNA的表达; 3.Western Blot检测不同蛋白在小鼠不同组织及敲除小鼠与对照小鼠中的蛋白表达情况; 4.HE染色检测Ift25基因敲除小鼠附睾及睾丸中精子发生不同阶段的形态变化; 5.生精细胞切片制备:生精细胞切片染色观察精子鞭毛附属结构; 6.SEM观察精子的超微结构变化及TEM观察附睾及睾丸的超微结构变化; 7.酵母双杂交实验及免疫共沉淀实验是检测蛋白之间的相互作用; 8.统计分析精子计数、精子运动速率、活精子比率等统计指标。 结果: 在雄性小鼠中，Ift25基因在睾丸组织中高度表达，并且在精子发生的第三阶段（精子鞭毛形成阶段）表达量呈上升趋势。为了探索Ift25在精子鞭毛形成中的作用，本研究在雄性生殖细胞中特异性敲除这个基因。结果发现与野生型小鼠相比，所有Ift25基因敲除小鼠都能够活到成年，并没有任何生长异常。然而，生育能力测试表明所有的基因敲除小鼠表现出完全不育。统计分析表明在ft25基因基因敲除小鼠中精子数量明显下降，且完全丧失运动能力。HE染色发现Ift25基因敲除小鼠曲精小管管腔中生精细胞数量明显下降，排列紊乱，成熟阶段的精子很少。光镜下观察到多种异常的精子形态，如圆形的头部，短而弯曲或末端肿胀的尾巴，分枝的鞭毛及异常增厚的鞭毛。透射电镜下观察到的精子异常表型与光镜下的形态变化一致。扫描电镜显示Ift25基因敲除的小鼠绝大多数发育成熟的精子失去“9+2”结构及附属结构，包括外层致密纤维，纤维鞘和线粒体鞘也被破坏。在Ift25基因敲除的小鼠附睾精子中，纤维鞘的主要组成成分AKAP4不表达;而外层致密纤维的组成成分之一ODF2仍然存在，但其定位的附属结构包括外层致密纤维和纤维鞘也被破坏。在Ift25基因敲除小鼠中，Ift27，是Ift25的一个相互作用蛋白，也完全消失。而且我们检测的其他Ift蛋白中，Ift20和Ift81在Ift25基因基因敲除小鼠中表达量明显下降，而ft74和Ift140的表达量却没有明显变化。 结论: 鞭毛内运输蛋白25（Ift25）是小鼠精子鞭毛形成和雄性生育所必需的蛋白，在调节精子发生过程中起着重要的作用。