淫羊藿素在多发性骨髓瘤细胞凋亡中对Wnt/β-catenin通路的影响

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jansan77
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察淫羊藿素对多发性骨髓瘤细胞株U266增殖、凋亡的影响,深入探讨其作用机制与Wnt/β-catenin通路的关系。方法:将多发性骨髓瘤U266细胞分为不同浓度淫羊藿素组,用CCK-8检测不同浓度淫羊藿素抑制率,探索最佳浓度。再将多发性骨髓瘤U266细胞分为空白组、来那度胺组、最佳浓度淫羊藿素组及来那度胺+最佳浓度淫羊藿素组,采用CCK-8检测细胞增殖、Annexin-V/PI双染检测细胞早期凋亡、qRT-PCR法检测各组细胞Wnt通路调节分子 β-catenin、GSK3 β 及下游靶基因 c-Myc、cyclin D1 mRNA 表达,Western blot法检测各组细胞β-catenin、GSK3 β蛋白表达。结果:1.CCK-8检测细胞增殖结果与空白组相比,24h和72h各浓度组淫羊藿素0D值没有统计学差异。在48h 32 umol/1浓度组与空白组相比,具有统计学差异,P<0.05。与空白组相比,来那度胺组和淫羊藿素组对U266细胞增殖抑制作用无统计学差异,但淫羊藿素+来那度胺组有统计学差异,P<0.05。淫羊藿素组与来那度胺组相比,无明显统计学差异。2.Annexin-V/PI双染检测细胞早期凋亡结果中低浓度(2 μmol/L、4 μmol/L、8 μmol/L)淫羊藿素对U266细胞早期凋亡的作用与空白组不明显。高浓度(16 μmol/L、32 μmol/L)淫羊藿素处理后,U266细胞早期凋亡率增加。空白组、淫羊藿素组、来那度胺组、淫羊藿素+来那度胺组各组第四象限早期凋亡率上升并不明显,但是第二象限中晚期凋亡和坏死细胞率增加。3.qRT-PCR法检测各组细胞mRNA表达结果β-catenin mRNA的相对表达量:与空白组相比,来那度胺组没有统计学差异;淫羊藿素组有统计学差异,P<0.05;淫羊藿素+来那度胺组有统计学差异,P<0.05。来那度胺组与淫羊藿素组有统计学差异,PP<0.05。淫羊藿素+来那度胺组与来那度胺组相比有统计学差异,P<0.05;与淫羊藿素组相比无统计学差异。GSK3β mRNA的相对表达量:与空白组相比,来那度胺组、淫羊藿素组没有统计学差异;淫羊藿素+来那度胺组有统计学差异,P<0.05。来那度胺组与淫羊藿素组有统计学无差异。淫羊藿素+来那度胺组与来那度胺组相比有统计学差异,P<0.05;与淫羊藿素组相比无统计学差异。c-Myc mRNA的相对表达量:与空白组相比,来那度胺组、淫羊藿素组没有统计学差异;淫羊藿素+来那度胺组有统计学差异,PP<0.05。来那度胺组与淫羊藿素组无统计学差异。淫羊藿素+来那度胺组与来那度胺组、淫羊藿素组相比均有统计学差异,P<0.05。cyclin D1 mRNA的相对表达量.:与空白组相比,来那度胺组没有统计学差异;淫羊藿素组有统计学差异,P<0.05;淫羊藿素+来那度胺组有统计学差异,P<0.05。来那度胺组与淫羊藿素组有统计学差异,PP<0.05。淫羊藿素+来那度胺组与来那度胺组相比有统计学差异,P<0.05;与淫羊藿素组相比无统计学差异。4.Western blot法检测各组细胞β-catenin、GSK3 β蛋白表达结果β-catenin蛋白表达:与空白组相比,来那度胺组无统计学差异;淫羊藿素组、淫羊藿素+来那度胺组有统计学差异,P<0.05;淫羊藿素+来那度胺组与来那度胺组比较蛋白表达差异有统计学差异,P<0.05。GSK3 β蛋白表达:与空白组相比,来那度胺组、淫羊藿素组差异有统计学意义、淫羊藿素+来那度胺组蛋白表达差异有统计学差异,P<0.05。来那度胺组与淫羊藿素+来那度胺组蛋白表达差异有统计学差异,P<0.05。结论:淫羊藿素可通过下调Wnt通路相关β-catenin、GSK3 β的基因及蛋白表达,并下调Wnt下游靶基因c-Myc、cyclin D1的基因表达,抑制多发性骨髓瘤细胞增殖、促进凋亡,并且可以增加来那度胺化疗敏感性。
其他文献
党风体现党的形象。加强党风廉政建设,深入开展反腐败斗争,是关系到党和国家生死存亡的大事。要有效地开展反腐败斗争,必须克服以下六种不健康心态。一是要克服无能为力的畏
木兰县是个典型的以农业生产为主的半山区县份。十多年来,我们坚持把生态农业建设作为推动农业生产可持续发展的基础工程来抓,取得了可喜的社会效益、经济效益和生态效益。19
廉洁自律高效是新的历史时期执法队伍的首要任务和条件。如何培养造就一支廉洁自律高效队伍,对于加速经济建设,建设有中国特色社会主义保驾护航至关重要。对此,我们分局结合
他,在一方教育上熔铸了真情。党的教育事业,在这方土地上赢得了人们(尤其是那些身处讲坛的人们)的全部忠诚。短短一年,推动宾安镇教育形势从低谷走出,步入迅速发展的轨道。此
生本教育理念是郭思乐教授提出的一种“为学生好学而设计”、“以生命为本”的一种教育理念。它以学生为主体,主张把师本教育转变为生本教育,让学生真正成为学习的主人。生本教育理念提倡并遵循“一切为了学生、高度尊重学生、全面依靠学生”的价值观、伦理观和行为观,充分尊重学生的天性,发掘学生的潜能。当下写作教学中存在诸如写作教学流程刻板单一,难以调动学生写作热情,未能实现学生的个性化表达等方面的问题。我们可以从
太平区是我市的一个老城区,底子薄,基础差,经济发展长期以来一直以乡镇企业为主体,单一的产业结构和激烈的市场竞争严重影响了区域经济的发展。近年来,我们致力于调整优化经
4月8-10日,由中国纱线网、中国纺织工程学会棉纺织专业委员会主办,天门纺机独家协办,赛特环球、东台展东、日发纺机、重庆金猫、金轮针布、无锡万宝、郑州天启、海马纺机、汇