粪肠球菌感染牙本质小管的激光共聚焦显微镜观察

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目的:通过激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope, CLSM)观察粪肠球菌(Enterococcus faecalis,)在牙本质小管内生长情况,以及药物作用后的杀菌效果。研究粪肠球菌在牙本质小管内的分布规律和影响分布的因素,初步探讨氢氧化钙糊剂的杀菌范围。方法:1、荧光显微镜和CLSM镜观察牙本质小管内粪肠球菌生存状态。2、分别取根管感染1,2,3,5,7天后的标本,荧光双染后观察牙本质小管内细菌状态。3、粪肠球菌感染根管28天后,分别封入氢氧化钙糊剂和蒸馏水,封药1,3,7天后,荧光双染后观察活菌状态。结果:1、成功建立根管感染模型,荧光显微镜和CLSM镜下,均观察到牙本质小管内的细菌,后者较清楚。2、粪肠球菌感染根管第3天起,有细菌侵入牙本质小管,随时间增加感染率和入侵深度明显增加,结果有统计学意义(P<0.05)。7天时入侵深度可达174-222μm。距牙本质小管口5μm内活菌百分比较整体活菌百分比高,有统计学意义(P<0.05)。3、随封药时间的延长杀菌范围随时间变化而增大,封药7天氢氧化钙杀菌范围>561.5μm,结果有统计学意义(P<0.05);结论:1、CLSM是观察牙本质小管内细菌的有效方法。2、牙本质小管内粪肠球菌感染率和入侵深度随时间增长而增长,后者7天可达174-222μm。培养7天活菌百分比可达35%,且活菌多分布于近牙本质小管口一端。3、根管内封氢氧化钙糊剂7天能杀灭距牙本质小管口562μm内的粪肠球菌。
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