子痫前期是孕妇和围产儿病率及死亡率的主要原因之一，病因至今未明，随着现代生殖免疫学发展，人们发现子痫前期可能是一种母胎免疫不相容疾病。胚胎是由继承了父系及母系双重组织特异性受精卵发育而来，所以它对母体来说具有“自己”和“异己”的组织抗原特性。正常的胎盘并非是细胞密不可透的屏障，在人类的妊娠中，胎儿血液可能进入母体血液循环中。理论上母体对携带有父系抗原的胎儿细胞会产生免疫反应，但是正常妊娠期间并没有发生母胎排斥现象，说明母胎之间存在复杂而完整的免疫耐受体系，一旦这种平衡被打破则导致病理妊娠，如流产、子痫前期等。从孕妇外周血分离出的胎儿细胞的类型主要有滋养细胞、淋巴细胞、粒细胞、胎儿有核红细胞4种。目前主要是通过分离外周血胎儿有核红细胞进行产前诊断或妊娠相关疾病的研究。其原因以下：1．胎儿有核红细胞生命周期较短，不受既往妊娠的干扰；2．含有全套的DNA遗传信息，分离出来可直接用来进行遗传学分析；3．在其表面有多种特异性抗原如转铁蛋白受体等，能有效地从孕妇外周血中分离出来。孕妇外周血50％有核红细胞为胎儿来源，故定量分析孕妇外周血有核红细胞可反映孕妇外周血胎儿抗原的水平。国外有学者发现，子痫前期外周血有核红细胞增多，并发生在临床出现之前，但胎儿抗原成分增多在子痫前期发病的免疫学机制起什么作用还不十分清楚。本研究目的通过应用流式细胞技术检测子痫前期孕妇外周血有核红细胞比例及细胞免疫功能的变化并与正常妊娠及未孕妇女进行比较，了解子痫前期患者胎儿抗原数量的变化对母体免疫功能的影响及与病情轻重的关系，从而对子痫前期发病机制有所认识。 【材料与方法】 1．研究对象 选择2005年11月至2006年6月在暨南大学第二临床医学院住院的子痫前期患者32例作为病例组，所有病例均符合《妇产科学》第六版子痫前期的诊断标准，其中重度组19例，轻度组13例。另选择同期住院分娩的健康孕妇30例作为正常妊娠对照。所有孕妇均为单胎妊娠，年龄20～35岁，既往无慢性高血压、糖尿病、肾炎、心脏病等内科疾病，血红蛋白≥100g／L，无吸烟、吸毒等不良嗜好，无输血、移植、免疫治疗病史。选取同期来我院正常身体检查，年龄20-35岁，未孕的健康妇女30例作为未孕对照组。 2．实验方法 2.1外周血淋巴细胞比例检测：采用流式细胞仪定量检测三组外周血中CD3<+>、CD3<+>CD4<+>、CD3<+>CD8<+>、CD3<+>CD4<+>／CD3<+>CD8<+>、CD3<->CD56+16<+>淋巴细胞百分比。 2.2外周血有核红细胞比例检测：应用单密度梯度分离法分离孕妇外周血单个核细胞层，应用CD71-FITC，CD13-PE，CD45-Cychrome三种抗体标记细胞，采用流式细胞仪划分CD71<+>／CD13<->CD45。区域，计算有核红细胞占单个核细胞的百分比，选择脐血作为阳性对照及未孕妇女外周血作为阴性对照。 3．统计学处理 实验数据统计采用SPSS11.0版本软件包进行统计分析，测定结果以x±s表示，各组的年龄、孕次、孕周、平均动脉压及外周血淋巴细胞比例及有核红细胞比例采用独立样本均数t检验。外周血有核红细胞比例与淋巴细胞水 平及平均动脉压相关性应用秩相关分析，计算Spearman相关系数。 【结果】 1、一般情况：将未孕组、正常妊娠组、病例组的年龄、孕次进行比较，各组之间比较无显著性差异(P>0.05)，病例组与正常妊娠组的孕周比较无差异性。病例组MAP(平均动脉压)与正常妊娠组比较明显升高(P<0.05)。 2、外周血淋巴细胞比例的比较：病例组与正常妊娠组比较，总T淋巴细胞无差异性，CD4<+>T细胞增加(P<0.001)，CD8<+>T细胞下降(P<0.001)，(2D4<+>／CD8<+> 升高(P<0.001)，与未孕比较无差异性(P>0.05)；病例组NK细胞与正常妊娠无差异性，重度组较轻度组明显升高(P<0.001)。 3、外周血有核红细胞比例比较：未孕妇女外周血几乎不含有有核红细胞，有核红细胞阳性表达率0.034±0.026％；正常妊娠组有核红细胞比例0.96± 0.85％，病例组2.74±1.08％，较正常妊娠组有显著性差异(P<0.001)；将病例组按病情程度分为轻度及重度两组并与正常比较，两两比较均有显著性差异(P<0.01)。 4、子痫前期外周血有核红细胞数量与外周血淋巴细胞水平相关性分析：对子痫前期外周血CD3<+>、CD4<+>、CD8<+>、CD4<+>／CD8<+>、NK细胞进行相关分析，发现子痫前期外周血有核红细胞比例与CD4<+>／CD8<+>正相关，r=0.838，P<0.001;与CD8<+>细胞呈负相关，r=-0.769，P<0.001． 5、子痫前期外周血有核红细胞数量与平均动脉压相关性分析：子痫前期外周 血有核红细胞比例与平均动脉压呈正相关，r=0.689，P<0.001． 【结论】 1、子痫前期患者外周血中有核红细胞数量较正常孕妇升高，说明子痫前期的发病与进入母体内的胎儿抗原成分增多有关。 2、子痫前期孕妇体内T淋巴细胞亚群数量较正常孕妇发生改变，提示T淋巴细 胞亚群的数量变化及相互间的平衡失调在子痫前期的发病机制中发挥重要作用。 3、子痫前期孕妇外周血有核红细胞与疾病程度呈正相关，同时与T淋巴细胞亚群及其比例变化存在相关性说明进入母血胎儿抗原成分可能在促发母胎免疫平衡失调方面有重要的作用。