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目的:基于“有故无殒”的中医用药理论,以具有效/毒二重性的麻黄细辛附子汤（MXF）为研究对象,采用正常和病证复合模型小鼠联合应用、对应分析的模式,给予不同给药剂量的MXF干预,探索病证和给药剂量因素对MXF效/毒作用选择性表达的影响,阐明“病证-量-效/毒”关系的客观真实性及科学内涵。借鉴“证治药动学”的研究方法,对正常和病证复合模型小鼠给予MXF干预后,目标效/毒成分在血浆中“时间-浓度”变化的研究,探讨病证因素对MXF目标效/毒成分血浆药代动力学的影响,为MXF临床安全合理用药提供实验依据。方法:1.采用LC和LC-MS技术,建立麻黄细辛附子汤中具有效/毒二重性的代表性化学成分（盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、盐酸甲基麻黄碱、卡枯醇、甲基丁香酚、芝麻脂素、细辛脂素、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱、乌头碱）的定性定量分析方法,以上述成分在煎剂中含量为指标,考察不同煎煮方法（经方煎煮方法-麻黄先煎法、临床常用煎煮方法-附子先煎法、实验室常用煎煮方法-诸药久煎法）和附子的不同炮制品规格（炮附片、黑顺片、淡附片、白附片、炒附片）对MXF煎剂质量的影响。采用单因素方差分析（One-way ANOVA）和多元统计分析方法评价煎剂质量,借助PLS回归数学模型提取可以表征煎剂质量的代表性成分。2、复制肾阳虚外感小鼠作为病证复合模型,给予正常和肾阳虚外感小鼠不同剂量的MXF,以一般生长状况情况、死亡率、心肌酶谱、肝功能、肾功能、脏器指数、呼吸代谢监测、肺部细胞因子表达量、组织切片作为药理学考察指标,观察不同剂量MXF干预下正常和肾阳虚外感小鼠的药理指标变化,从而探究病证和给药剂量因素对于MXF效/毒作用选择性表达的影响。3、采用单因素方差分析和多变量模式识别的统计方法,对药理实验结果进行综合评价分析,探究不同给药剂量的MXF对正常和肾阳虚外感小鼠效毒作用表达的影响。基于正常和肾阳虚外感小鼠的药理实验结果建立PLS回归数学模型,分别提取出可以表征MXF干预后“毒”和“效”作用表达的代表性药理指标,从耐受性差异、作用靶器官、量-效/毒关系、作用规律等方面综合分析MXF作用于正常和病证状态下药理效应的异同,阐明MXF效毒选择性表达的客观存在。4、采用LC/QQQ技术,建立血浆生物样本中MXF目标效/毒成分（盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、盐酸甲基麻黄碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱）的分析方法。5、采用单次口服给药方式,测定给予MXF后目标效/毒成分在正常模型、病证模型血浆中“时间-浓度”变化的研究,通过比较MXF给药干预后目标效/毒成分在正常小鼠和肾阳虚外感模型小鼠体内的血药浓度,采用统计矩法计算药代动力学参数,考察病证机体状态对MXF中目标效/毒成分血浆药代动力学特征的影响。结果:1、采用LC和LC-MS测试手段分别建立MXF煎剂中目标效/毒成分的色谱定量分析方法,并对其进行方法学验证,结果显示分析方法准确、可靠、可重复,满足上述成分煎剂中含量测定的要求。经方煎煮方法的附子煎煮时间最短,但是MA和AC的溶出度却最低,且其单酯型生物碱的溶出度反而高于附子煎煮时间长的附子先煎法;炒附片较其他附子炮制品规格所制备的MXF煎剂,双酯型生物碱含量最低、单酯型生物碱含量最高,且麻黄类生物碱的含量最低。双酯型生物碱MA和AC可以作为表征不同煎煮方法制备MXF煎剂的代表性成分,卡枯醇、甲基丁香酚、细辛脂素、MA、HA、AC可以作为表征附子不同炮制品规格所制备MXF煎剂的代表性成分。2、与正常组小鼠相比,各给药组的体质量在给药第3-4天出现了显著性差异的降低,给药后第1天的肛温出现“一过性”升高;各给药组心肌酶谱（CK、CK-MB、AST）、肝功能（AST）、肾功能（尿素）均有显著性差异;部分给药组肺指数、肾指数和睾丸指数呈现出显著性差异;各给药组肺部MCP-1和IL-12p70的表达趋势与给药剂量呈现出明显的负相关。3、复制肾阳虚外感模型成功后,模型组小鼠第3天出现死亡,体质量和肛温在第4天出现了“拐点”,之后开始持续下降。与正常组小鼠相比,模型组小鼠的心肌酶谱（CK、CK-MB、α-HBDH、LDH、AST）、肝功能（ALT、AST、ALP）、肾功能（尿素、肌酐、胱抑素C、β2微球蛋白）均呈现出显著性差异;肺、肾、胸腺、肾上腺、精囊腺指数呈现出显著性差异;产生的能量H1和H2数值呈现显著性下降;肺部IL-6、IL-10、MCP-1、IFN-γ、TNF-α细胞因子的表达呈现显著性差异。与模型组小鼠相比,给予肾阳虚外感小鼠不同给药剂量的MXF后,行为和精神状态均有所改善,体质量和肛温呈现了不同程度的回调升高趋势。模型组小鼠上述异常的生化指标,呈现出不同程度的回调;脏器指数中肺指数呈现出显著性下降,肾指数和胸腺指数出现不同程度的回调;RER、H1和H2指标呈现回调趋势,并呈现明显的与给药剂量的正相关;肺部IL-6、IL-10、MCP-1、IFN-γ、TNF-α的表达出现不同程度的下降回调,IL-12p70表达都有不同程度的升高。正常组、模型组和各给药组的心、肾组织均无明显病变。与正常组相比,模型组动物的肺组织呈明显的炎性损伤,肝脏组织呈明显的水样病变;不同给药剂量的MXF干预后,可不同程度地改善病变情况,以40倍给药组改善程度最大;模型组小鼠的红白髓分界模糊和白髓体积增大,10倍给药组改善效果不明显,30倍和40倍给药组改善程度较大,但是60倍给药组小鼠脾脏的白髓部分开始出现不规则样变化。4、根据正常小鼠和肾阳虚外感小鼠药理实验结果建立的PLS回归数学模型,提取出的表征MXF对于正常小鼠“毒”作用的评价指标:体重（第3、4天）,肛温（第1天）,心肌酶谱（CK、CK-MB）,肝功能（AST、ALT）,肾功能（尿素）,脏器指数（肝指数、肺指数）,TSE（RER、H1、H2）、肺部细胞因子表达（MCP-1、IL-12p70）;提取出的表征MXF对于肾阳虚外感小鼠“效”作用的评价指标:体重（第1、2、3、4、5、6、7天）,肛温（第1、2、3、5天）,肝功（碱性磷酸酶）,脏器指数（肾指数、精囊腺指数）,TSE（RER、H1、H2）、肺部细胞因子表达（MCP-1、TNF-α）。5、正常小鼠药理实验结果建立的PLS回归数学模型,对各给药组预测的综合药理评分结果,30倍给药组的综合药理评分最低。肾阳虚外感小鼠药理实验结果建立的PLS回归数学模型,对各给药组预测的综合药理评分结果,40倍给药组的综合药理作用得分最高。6、根据FDA生物样品定量分析方法的指导原则,对所建立分析测试方法的进行了系统的方法学验证,所建立的分析方法准确、可靠、可重复,满足生物样本含量测定的要求。E、PE、ME三种麻黄类生物碱在肾阳虚外感组小鼠体内的AUC0-t、AUC0-∞、t1/2、MRT 0-t、MRT0-∞等药代动力学参数值显著高于正常组,CLz/F则正好相反。BMA、BAC、BHA三种附子类生物碱在肾阳虚外感组小鼠体内的Tmax、Cmax药动学参数值显著高于正常组。E、PE、ME、BMA、BAC、BHA6种待测成分在肾阳虚外感组小鼠体内的药-时曲线均出现了明显的双峰现象。结论:1、不同的煎煮方法和附子不同炮制品规格制备所得煎剂中效毒成分的含量存在明显差异,经方所用煎煮方法和附子炮制品规格制备的煎剂,不仅可以降低麻黄类生物碱和附子双酯型生物碱的含量,以减少麻黄和附子的毒副作用,而且附子单酯型生物碱含量反而最高,做到了炮制减毒而不失效,从而证实了经方煎煮方法和所选用附子炮制品规格的科学性,为经方的古为今用提供参考。2、病证因素可影响MXF效/毒作用选择性表达,给予正常小鼠不同剂量的MXF后,随着给药剂量的增大,选择性表达其“毒”的作用;给予肾阳虚外感证小鼠MXF后,机体机能“低下”的状态影响效毒二重性化学成分的体内代谢吸收过程,进而影响病证机体机能和代谢水平,反而选择性表达其“效”的作用。3、MXF对于正常小鼠干预的“量-毒”关系,与给药剂量呈现出明显的正相关;MXF对于肾阳虚外感小鼠干预的“量-效”关系,本研究中40倍给药剂量成为MXF“效”“毒”作用选择性表达的剂量拐点。4、MXF对于正常小鼠的毒副作用,表现最为明显的“时间拐点”在给药后的第3-4天,肾阳虚小鼠在接种病毒后的第3-4天是其生存“拐点”,肾阳虚外感小鼠给予MXF第后3-4天是机体机能状态恢复的“拐点”。5、正常小鼠80倍给药剂量组当天就全部死亡,肾阳虚外感小鼠80倍给药剂量,在给药当天并未出现死亡,给药第2天出现全部死亡,这提示肾阳虚外感的病证状态提高了机体对毒性成分的耐受。6、E、PE、ME在肾阳虚外感的机体状态下有较好的吸收,同时延缓了其在体内的代谢速度,生物利用度提高。BMA、BAC、BHA在肾阳虚外感的机体状态下吸收速率降低,说明通过延迟吸收减弱毒性。