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多溴联苯醚(PBDEs)主要作为添加型阻燃剂而广泛应用于电子电器、纺织品、家居等产品中,同时,PBDEs也是电子垃圾处理过程中释放出来的一类主要污染物。环境化学分析证明,PBDEs存在于各种环境介质和生物体中,包括人类血清和乳汁等。而毒理学研究表明,PBDEs的主要毒性效应为甲状腺内分泌干扰和神经毒性。电子垃圾处理过程中也释放多种重金属,例如铅(Pb)。本论文以斑马鱼(Danio rerio)为对象,开展了PBDEs单独以及与Pb复合暴露对斑马鱼的神经发育毒性效应和内分泌干扰效应的研究。主要研究结果如下: 1.完成了PBDEs低溴复合物(DE-71)暴露对斑马鱼早期多巴胺能系统和5-羟色胺能系统影响的研究。将受精后2小时(2-hpf)的斑马鱼胚胎暴露于DE-71(3、10、30和100μg/L)至120-hpf。化学分析显示,PBDEs可以在斑马鱼体内富集。DE-71暴露并未引起明显的发育毒性效应,例如孵化率、存活率、畸形率和生长,但却抑制了多巴胺能神经元发育相关蛋白(manf,bdnf,nr4a2b)和5-羟色胺合成以及神经元发育相关蛋白(tph1,tph2,trhr,fgf8,shha, wnt1)的基因表达,下调单胺类神经递质合成酶酪氨酸羟化酶(TH)和神经发育相关蛋白髓鞘碱性蛋白(MBP)和突触蛋白Ⅱa(SYN2a)的蛋白表达。HPLC分析表明,斑马鱼仔鱼体内的多巴胺(DA)、二羟基苯乙酸(DOPAC)和5-羟色胺(5-HT)的含量显著下降,同时体内多巴胺转运蛋白(DAT)的蛋白含量以及5-羟色胺转运(serta, sertb)和受体(htrlaa,hertab)的基因表达都显著下调。暴露的斑马鱼仔鱼运动速率显著下降。研究结果显示,PBDEs暴露干扰了多巴胺能神经信号和5-羟色胺能神经信号传导系统,引起神经发育毒性。 2.完成了高溴PBDEs(BDE-209)与Pb长期低剂量复合暴露对斑马鱼的生殖内分泌干扰效应和繁殖影响以及甲状腺内分泌干扰和神经发育毒性效应的研究。性成熟的斑马鱼单独暴露于Pb(10μg/L)和BDE-209(1、10和100μg/L)以及两者复合暴露(Pb+BDE-209:10+1,10+10,10+100μg/L)3个月。结果显示,Pb和BDE-209单独暴露导致产卵量有下降趋势,复合暴露进一步降低产卵量,但是,与溶剂对照组相比均没有显著差异。雄鱼血清中睾酮(T)和11-酮基睾酮(11-KT)含量均显著降低,而T的含量在复合暴露中进一步下降。雌鱼血清中T和雌二醇(E2)含量显著减少。结果表明,长期低剂量暴露可引起性激素内分泌干扰效应。 长期低剂量暴露可影响斑马鱼的甲状腺激素含量:表现为在雄鱼中,BDE-209单独及与Pb复合暴露,血清中甲状腺激素T3含量显著升高,而雌鱼血清中T4含量则显著下降。测定了子代的甲状腺激素含量,与对照组相比,在Pb与BDE-209复合暴露,子代鱼卵内的甲状腺激素T3和T4含量显著降低。 长期低剂量暴露也可影响子代的神经发育:表现为来自Pb和BDE-209单独暴露的子代体内的神经发育蛋白SYN2a和MBP的蛋白表达都显著下调,Pb与BDE-209复合暴露进一步降低SYN2a和MBP的蛋白表达。运动行为测定发现,Pb和BDE-209单独暴露可显著降低斑马鱼仔鱼的运动速率,而在复合暴露中,斑马鱼仔鱼的运动速率进一步降低。 综上所述,PBDEs可通过影响神经递质信号传导系统,引起神经发育毒性。与Pb长期低剂量复合暴露,可干扰生殖和甲状腺内分泌系统,引起血清中性激素含量的减少,和甲状腺激素的改变;研究发现,母代(F0)暴露于PBDEs和Pb,可引起未暴露的子代(F1)的神经发育毒性、甲状腺内分泌干扰效应,因此具有传代毒性。