ASX对OTA中毒小鼠雄性生殖机能保护作用的研究

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赭曲霉毒素A(OTA)是大自然中最为常见的一类真菌毒素。有研究表明,OTA会影响动物睾丸组织发育和精子发生。另外,OTA作为一种内分泌干扰物,影响类固醇激素的合成,进而影响雄性生殖系统的性能。虾青素(ASX)作为一种有效的抗氧化剂,在机体康健和营养物吸收中具备相当大的潜力和应用,ASX具有的生物活性已经在男性不育的临床研究里得到验证。然而,ASX对OTA染毒的雄性小鼠生殖系统损害的保护作用到目前尚不清楚。本试验利用ASX处理OTA感染的雄性小鼠,将80只雄性C57小鼠分为空白对照组、OTA组、ASX组、OTA+ASX组,通过灌胃的方法喂药,试验周期28天。通过检测小鼠睾丸指数、结构、精液品质、血清睾酮含量、抗氧化指标、m TOR信号通路和血睾屏障的相关基因表达水平。探讨ASX对OTA致小鼠生殖损伤解毒效果的研究。结果如下:(1)ASX对OTA小鼠睾丸组织毒性的影响(1)与对照组比较,单独OTA灌胃,睾丸脏器指数显著降低。与OTA组比较,灌胃OTA+ASX,睾丸脏器指数显著升高,说明了添加ASX能够缓解OTA对睾丸组织发育的损伤作用。(2)睾丸HE染色观察:对照组小鼠睾丸组织的生精小管内的构造相对完整,以及各级生精细胞表现为分列紧凑有序。OTA组小鼠睾丸组织生精细胞分层紊乱,呈不规则外形或脱落,生精小管直径变小。ASX组显示出生精细胞排列比较整齐,紧密,脱落数量减少。OTA+ASX组小鼠睾丸组织的生精细胞空泡化减弱和精原细胞数量增加。睾丸超微结构观察:对照组各个生精细胞和支持细胞的内部构造清晰完整,核膜,核仁外观清晰。线粒体存在于细胞质中,形态正常,显现卵形或短棒状。OTA组鼠睾丸组织的生精细胞中有自噬体的出现,线粒体在形状上发生了变动,有的线粒体呈现不规则形状,线粒体呈现了局部空泡化的现象。ASX组小鼠睾丸组织各个生精细胞细胞内的结构清晰完整,形态正常,核膜完好,线粒体没有肿胀空泡的现象,内质网状态无明显的差别。OTA+ASX组小鼠睾丸组织细胞中的内质网出现轻微的肿胀现象。说明ASX能够缓解OTA对睾丸组织结构的损伤。(3)与对照组比较,单独OTA灌胃,血清中睾酮的分泌水平降低。与OTA组比较,灌胃OTA+ASX,明显增高血液睾酮水平。说明ASX对OTA引起的睾丸组织的损伤具有一定的修复作用。(4)与对照组比较,单独OTA灌胃,精子畸形率增高,精子活动参数降低。与OTA组比较,灌胃OTA+ASX,降低精子畸形率,增高精子活动参数。说明ASX能够减少OTA对精子的毒性作用。(2)ASX对OTA小鼠抗氧化损伤的影响与对照组比较,单独OTA灌胃,使睾丸组织MDA的含量增加,CAT、SOD和GSH活力减弱。与OTA组比较,灌胃OTA+ASX,使睾丸组织中MDA的含量减少,CAT、SOD和GSH的活力增强。说明ASX可以减缓OTA对睾丸组织的氧化损害。(3)ASX对OTA小鼠睾丸组织m TOR信号通路和血睾屏障的影响与对照组比较,单独OTA灌胃,提高Beclin、ULK、ATG5、LC3、NDP52的m RNA表达水平,以及降低m TOR、cldn11、Vim、Occludin、N-cad和ZO-1的m RNA表达水平。与OTA组相比,灌胃OTA+ASX,降低Beclin、ULK、ATG5、LC3、NDP52的m RNA表达水平,以及升高m TOR、cldn11、Vim、Occludin、N-cad和ZO-1的m RNA表达水平。说明ASX对能够抑制OTA引起的睾丸组织m TOR信号通路和血睾屏障的激活。结论:ASX可以抑制OTA对雄性小鼠睾丸组织损伤、精子毒性、氧化损伤以及m TOR信号通路和血睾屏障的激活。
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