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本研究分为二部分: 第一部分:葡聚糖修饰的SPIO纳米粒最佳工艺条件确定及其质量评价 目的:确定葡聚糖修饰的超顺磁性氧化铁(Superparamagnetic ironoxide,SPIO)纳米粒最佳工艺条件,并对其质量进行评价。 方法:从影响SPIO纳米粒的粒径的4个因素入手,利用四因素三水平的正交实验设计,找出制备SPIO纳米粒的最佳制备工艺条件,在该条件下制备出SPIO样品,分别用透射电镜、粒度分析仪对其进行形貌观察及粒径检测,用原子吸收分光光度计测定其铁含量,红外光谱仪分析表征,X射线粉末衍射法进行成分鉴定,振动样品磁强计测定磁学参数,并标记卵巢癌细胞实验验证磁学性质。 结果:四因素三水平的正交实验结果得出的最佳工艺条件是:葡聚糖浓度为10 mg.mL-1,反应溶液pH值10,反应温度80℃,搅拌速度600 r.min-1;透射电镜结果显示SPIO颗粒外貌呈球形,分布较均匀,大小较一致,粒径范围在10nm以内;粒度分析得出SPIO的平均粒径7.0nm,分散性为0.059;分光光度计测得SPIO铁含量为12.360±0.08mg.ml-1;红外光谱分析显示Fe3O4外成功包裹上葡聚糖;X射线粉末衍射法测定样品成分为Fe3O4;磁学参数提示具有超顺磁性;标记细胞后发现SPIO能顺利进入,并使细胞带有磁性。 结论:正交实验得出的最佳工艺条件能成功制备的SPIO纳米粒,性质稳定、粒径较小、分散性较好,能顺利进入标记癌细胞并使细胞具有一定磁性,这将对随后的肿瘤特异性探针制备奠定基础。 第二部分:SPIO-PLL纳米粒制备、结构验证及其空间结构表征 目的:探讨葡聚糖修饰的超顺磁性氧化铁(Super-paramagnetic ironoxide-polylysine,SPIO)连接多聚赖氨酸(polylysine,PLL)纳米粒的制备及其结构验证和空间结构表征。 方法:在共沉淀法制备葡聚糖修饰的SPIO基础上,加入PLL制备出一种新的SPIO-PLL纳米粒,粒度电位分析仪、透射电镜(Transmission electron microscopy,TEM)对SPIO-PLL的粒径、电位、形貌学检测;高效液相凝胶色谱法(Gel permeation chromatography,GPC)、红外光谱(Fourier Transform Infrared Spectroscopy,FTIR)及核磁共振氢谱法(1HNMR.)对SPIO-PLL连接成功与否进行验证;高精度的原子力显微镜(Atomic force microscope,AFM)对SPIO-PLL的结构、形态及连接状态进行空间结构表征。 结果:粒度电位分析和TEM结果显示SPIO-PLL的平均粒径7.37nm,平均电位13.6 mV; GPC、FTIR及1HNMR.结果显示SPIO及PLL之间已经成功连接;高精度AFM清楚显示出SPIO与PLL之间以亚胺键形式稳定相连。 结论:已经成功制备出一种性质稳定、粒径较小的新型SPIO-PLL纳米粒,这将对随后的肿瘤特异性探针制备奠定一定的基础。