枸橼酸阿尔维林可以减缓平滑肌细胞的收缩,是高选择性的钙离子通道调节剂。临床上主要用于肠易激综合征,尤其是腹泻型肠易激综合征,以及结肠痉挛性疼痛、功能性腹痛综合征的治疗,也用于胆道和子宫的痉挛性疼痛,胃肠道功能性消化不良,泌尿道结石或感染引发的痉挛性疼痛等疾病的治疗。但是枸橼酸阿尔维林在中国药典中还没有被收载,无国家质量标准,国内外有关它的研究报道多是集中在临床治疗效果以及可能存在的毒副作用等方面,在国内对其原料药以及中间体N-乙基苯丙胺(以下简称“中间体1”)的质量研究较少,而且,目前在主流的欧洲药典和英国药典中,其含量测定方法依然采用传统的非水滴定法和永停滴定法,但是该分析方法不如液相色谱先进,操作不方便,选择性差,准确度、精密度不高,相对误差大。因而,在本实验室前期工作的基础上,利用高效液相色谱法对枸橼酸阿尔维林原料药及其中间体1的含量测定方法学进行了系统研究,并在目前合成规模下,分别对枸橼酸阿尔维林原料药及其中间体1的3批样品进行了含量分析,均得到了令人满意的实验结果;此外,本实验室尚对枸橼酸阿尔维林原料药的破坏性实验进行了初步探讨,确定了合适的HPLC条件,实验表明:作为供试品的枸橼酸阿尔维林原料药在酸、碱、加热及光照破坏条件下稳定性较好;在氧化破坏条件下,稳定性略差。主要实验内容及结果如下:(1)枸橼酸阿尔维林原料药含量测定色谱条件:色谱柱:Inertsil ODS-3C18(5.0μm,4.6mm×250mm);柱温:30℃;流动相:0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液(含1%三乙胺,用磷酸调至pH=3.0)-乙腈(60:40);检测波长为220nm;进样量:10μL。并检测了目前实验规模下,自制枸橼酸阿尔维林原料药3批样品的含量,含量分别为99.92%、99.87%和99.93%。此研究显示,目前实验规模下该合成路线制备的枸橼酸阿尔维林原料药含量较高,且较为稳定,符合要求。(2)中间体1的含量测定色谱条件:色谱柱:Agilent TC C18(5.0μm,4.6mm×250mm);柱温:30℃;流动相:0.02mol/L乙酸铵缓冲溶液-乙腈(75:25);检测波长:220nm;进样量:10μL。并对目前实验规模下,自制的3批中间体1样品进行含量测定分析,含量分别为99.58%、99.46%和99.57%。研究结果显示中间体1含量较高,符合要求,且本合成工艺稳定性较好,产品含量批间波动较小。(3)枸橼酸阿尔维林原料药破坏性试验的色谱条件:色谱柱Inertsil ODS-3C18(5.0μm,4.6mm×250mm);柱温:30℃;流动相:0.01mol/L的辛烷磺酸钠溶液(含1%三乙胺,用磷酸调至pH=3.0)-乙腈(60:40);检测波长:220nm;进样量:10μL。结果表明:作为供试品的枸橼酸阿尔维林原料药在酸、碱、加热及光照破坏条件下稳定性较好;在氧化破坏条件下,稳定性略差。由此提示,对于枸橼酸阿尔维林原料药,在日后的生产、储存、包装及运输过程中,须着重考虑氧化因素对其稳定性可能的影响。通过上述实验结果和色谱图可知,本实验拟定的各色谱条件的分离度较高,专属性较好;目前实验规模下,所制备的枸橼酸阿尔维林原料药及其中间体1的含量较高,其合成工艺质量较为稳定,产品含量批间波动较小;且作为供试品的枸橼酸阿尔维林原料药在酸、碱、加热及光照破坏条件下稳定性较好,然而在氧化破坏条件下,稳定性略差,由此提示,对于枸橼酸阿尔维林原料药,在日后的生产、储存、包装及运输过程中,须着重考虑氧化因素对其稳定性可能的影响。本实验首次采用高效液相色谱法对枸橼酸阿尔维林原料药及中间体1的含量测定方法学做了系统研究,并对自产的3批样品进行了含量测定研究,同时尝试对枸橼酸阿尔维林破坏性实验进行初步探讨。这些研究,不仅为枸橼酸阿尔维林原料药的注册申报奠定了基础,而且为其原料药和中间体的进一步质量研究提供了参考。