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禾长蠕孢菌(Helminthosporium gramineum Rabenh. f.sp.echinochloae,简称HGE)是从广西自然感病稗草上分离得到的杂草生防潜力菌。耿锐梅等用禾长蠕孢菌孢子悬浮剂在田间进行杂草防除试验发现3.0×107孢子/m2悬浮剂对稗草防效可达到85.2%,对稻田中的其它常见杂草也有较强的致病作用并对水稻、小麦、玉米、棉花、油菜等主要作物安全。因此,禾长蠕孢菌具有开发成真菌除草剂的潜力,其孢子可作为真菌除草剂的主要活性成分。然而,禾长蠕孢菌在大规模生产中孢子产量较低,剂型加工技术困难,使其商品化受到限制。本研究对禾长蠕孢菌固态发酵培养基和培养条件进行优化,期望通过条件优化将孢子产量提高到107孢子/克干物质以上。放大发酵体系,保证孢子产量及质量基本不变,为工业化生产打下了坚实基础。制剂研制过程中,综合评价助剂的分散力、稳定性、悬浮率以及与孢子的生物相容性,筛选出对禾长蠕孢菌孢子无毒或毒性较小的助剂种类,并通过二次通用旋转组合试验优化助剂组合。期望通过剂型研究减少禾长蠕孢菌孢子对结露期的依赖,刺激孢子萌发,提高毒力、扩散能力及粘着力,避免紫外损伤等。剂型的成功研制决定了微生物除草剂的开发、登记注册和商品化。本文的研究内容及结果如下:禾长蠕孢菌固态发酵产孢培养基及培养条件研究。以珍珠岩为底物基质,每100mL珍珠岩(大约7.1g)中添加4g米粉、1g豆粕粉、0.2g Na3PO4·12H2O、0.1g MgSO4,水分添加量为40mL(培养基含水量约为76.5%),接入8mL菌悬液,搅拌均匀,黑暗条件下28℃静置培养14d,黑光灯12h循环光照,诱导产孢。孢子最高产量可达1.12×107孢子/克干物质。禾长蠕孢菌固态发酵扩大培养研究。扩大固态发酵体系,在大托盘上进行禾长蠕孢菌固态发酵产孢试验,培养基组成按上述结果等比例扩大,培养条件采用优化后的条件。试验结果表明,利用大托盘进行固态发酵的最高产孢量可以达到1.45×107孢子/克干物质。随后,用真菌孢子分离器收集培养物中的孢子,并对所获孢子粉进行孢子质量检测。结果表明,孢子粉的含水量为7%8%,孢子粉的含孢量为3.02×107孢子/克,孢子萌发率基本在99%以上,说明扩大培养所获得的孢子质量和孢子产量能够达到标准,可以作为剂型研究的原材料。禾长蠕孢菌孢子制剂研究。研究发现珍珠岩粉末对菌丝体生长没有影响,孢子粉(g):珍珠岩粉末(g)的最佳混合比例为3:1。大豆油对菌丝体生长没有影响,按照孢子粉(g):大豆油(mL)为2:1比例混合后,对孢子萌发有促进作用。在表面活性剂和稳定剂的筛选中,综合其分散力、悬浮率、稳定性和生物相容性的影响,最终选择SP-20为表面活性剂,羧甲基纤维素钠为稳定剂。二次通用旋转组合试验优化出禾长蠕孢菌孢子制剂的配方为:100 g孢子粉中添加33g珍珠岩粉末,25 mL大豆油,49 g羧甲基纤维素钠,10g SP-20,0.66 g增效剂A,2.6 mL增效剂B。