【摘 要】
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在大面积组织体外构建中,细胞接种是关键步骤.本研究以人体成纤维细胞和PEI无纺布支架材料作为组织工程的研究模型,利用培养袋生物反应器作为研究平台对大面积支架材料的接种
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在大面积组织体外构建中,细胞接种是关键步骤.本研究以人体成纤维细胞和PEI无纺布支架材料作为组织工程的研究模型,利用培养袋生物反应器作为研究平台对大面积支架材料的接种方法进行了研究.
实验考察了三种不同孔径和孔隙率的PET支架材料对成纤维细胞接种率、增殖和分布等的影响,结果表明较大孔径和孔隙率的PET材料有利于细胞增殖和分布,可作为下一步研究的支架模型.静止、灌注、竖直摇床和水平摇床接种四种不同接种方式的比较研究表明,动态接种方式在接种率和细胞分布上优于静态接种,水平摇床接种具有一定优势.进一步以水平摇床接种为研究对象,考察摇动频率(60、100和200rpm)和起始悬液密度(4.0、8.0和12.0x105cells/mL对接种过程的影响,结果表明低细胞悬液密度接种,接种率随摇动频率的增加而下降,高细胞悬液密度接种时则反之；细胞分布均匀度都随着摇动频率的增加而下降,起始细胞悬液密度对细胞分布影响较小.通过对水平摇床接种过程机制的初步探讨,采用水平摇床摇动(60rpm,5min)和静止(15min)相间隔的接种方法增加了细胞和支架材料的接触时间,有利于细胞充分贴附,细胞接种率提高到53.6％.进一步培养结果显示,细胞在支架材料中能够很好的增殖且分布均匀,在组织构建中利用培养袋生物反应器进行水平摇床摇动接种是可行的.
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