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浙东白鹅是我国优良的地方家鹅品种之一,具有早期生长快、肉质鲜嫩、性成熟早和抗病力强的优点,在近几年畜牧业结构调整中脱颖而出,得到快速发展。但是,浙东白鹅具有很强的就巢性而直接影响到母鹅产蛋量,致使其繁殖力低,无法适应大规模产业化生产。因此开展浙东白鹅就巢性的分子遗传机理研究,了解影响其就巢行为的遗传因素,通过推动分子遗传标记辅助选择进行品种选育。催乳素是垂体前叶催乳素细胞分泌的多肽类激素,具有促进家禽繁殖、生长发育、渗透调节、新陈代谢和免疫等功能,在禽类,催乳素主要诱导和维持母禽的就巢性能。本研究以影响家禽就巢性的主要基因-催乳素基因(PRL)、催乳素受体基因(PRLR)及影响催乳素表达的垂体特异性转录因子1(Pit-1)为候选基因来研究浙东白鹅就巢性的分子遗传机理,首先通过PCR技术获得三个候选基因的DNA序列,然后通过荧光定量PCR技术SYBR Green I方法,研究了催乳素和催乳素受体基因在浙东白鹅的产蛋期、就巢期和恢复期三个生理时期,下丘脑、垂体和卵巢组织中的表达特点,最后通过PCR-SSCP技术研究了催乳素、催乳素受体和垂体特异性生长因子在浙东白鹅群体中的SNPs,应用统计分析软件SPSS13.0分析了SNPs标记与浙东白鹅生长繁殖性状的相关性,得到了以下主要实验结果：1.通过PCR扩增获得了浙东白鹅催乳素(PRL)基因的全序列,长度为5917bp,它含有5个外显子,分别为27 bp、181 bp、107 bp、179 bp、191 bp。Genebank登录号为DQ660983。获得了浙东白鹅催乳素受体(PRLR)基因的部分序列,长度为1305 bp,为其主要外显子序列,Genebank登录号为DQ660982。获得了浙东白鹅垂体特异性转录因子1(Pit-1)基因的5个含外显子的DNA序列,长度分别为963 bp、803 bp、253 bp、169 bp、210 bp,Genebank登录号为EF522106(963 bp and 803 bp)、EF457938 (253 bp and 169 bp)、EF413635 (210bp)。获得了浙东白鹅的看家基因3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的部分DNA序列为235 bp,在Genebank登录号为DQ454070。同时,扩增得到GAPDH的mRNA序列为209 bp,在GeneBank登录号为DQ821717。2.用荧光定量PCR技术SYBR Green I方法研究发现浙东白鹅PRL和PRLR基因在产蛋期、就巢期和恢复期的表达量具有显著差异(P<0.05),其中就巢期和恢复期的表达量差异极显著(P<0.01)。就巢期鹅的PRL基因和PRLR基因表达量最高,其次为产蛋期鹅,恢复期鹅PRL基因表达量最小。对不同组织PRL的表达量分析,发现在垂体与下丘脑、卵巢中的表达量有极显著的差异(P<0.01),卵巢与下丘脑的表达量差异显著(P<0.05)。PRL表达量垂体>下丘脑>卵巢。对不同组织PRLR的表达量分析,发现在垂体与卵巢中的表达量、卵巢与下丘脑的表达量均有极显著的差异(P<0.01),在垂体与下丘脑中的表达量差异不显著(P>0.05)。PRLR表达量垂体>下丘脑>卵巢。浙东白鹅PRL和PRLR的表达具有极显著的相关性(P<0.01),其表达量的相关系数是0.698。3.应用PCR-SSCP技术对浙东白鹅PRL基因SNPs多态位点的检测表明,PRL基因在检测的DNA长度范围内有14个单碱基突变位点,均是无义突变。其中突变在479 bp(C-A).502 bp(A-C).511 bp(G-C).515 bp(A-G).520 bp(C-A).575 bp(T-G)3985 bp(G-A).5070 bp(T-C).5170 bp(G-C).5343 bp(T-C).5344 bp(G-A)5478 bp(T-G).5612 bp(G-T)分布在内含子区域,不会导致编码氨基酸的变化；5856 bp(A-C)突变在外显子5中,都编码丝氨酸,是无义突变,没有导致编码氨基酸的改变。应用特异性引物法对浙东白鹅PRLR基因SNPs多态位点的检测表明,PRLR基因的2个突变位点均处于外显子中,其中694 bp(A-C)编码氨基酸都是组氨酸(His),是无义突变；981 bp(A-G)编码氨基酸从天门冬氨酸(Asp)变为甘氨酸(Gly),是有义突变。对就巢性不同的鹅种的PRLR基因SNPs的检测结果表明其与就巢性有一定的关系。结合PRL基因SNPs的PIC和harurdy-weinberg平衡的情况,得出PRL和PRLR基因是影响浙东白鹅就巢性的主要基因。对PRL和PRLR基因的SNPs与浙东白鹅生长繁殖性状的相关分析表明,PRL基因位点P-1以较高的多态性与浙东白鹅的体重有显著相关(P<0.05)：PRL基因位点P-8多态性和浙东白鹅胸宽有显著相关(P<0.05)：PRLR基因的981 bp(A-G)位点、PRL基因位点P-1、P-8与浙东白鹅Fl代的初生重有显著相关(P<0.05)。