妊娠期糖尿病(Gestational diabetes mellitus,GDM)通常是指孕期发现或初次确诊的葡萄糖耐受不良,为妊娠期最常见并发症之一。尽管GDM通常于分娩后缓解,但对母儿健康均存在危害。Chemerin是一种脂肪因子,可以调节脂肪细胞的成熟、分化,并与肥胖人群的血管炎症和胰岛素敏感性有关。但关于chemerin与GDM的关系研究较少。TNF-α是一种介导多种炎症反应,参与免疫调节的因子,与胰岛素抵抗关系密切。而GDM时,TNF-α与chemerin之间的相互关系研究不多且存在争议。本研究分别测定GDM孕妇及正常孕妇妊娠晚期外周血及脐血中chemerin及TNF-α的表达,同时测定胎盘组织及脐带组织中Chemerin与TNF-α的表达水平,以探讨Chemerin、TNF-α在GDM中的作用及其对胎儿的影响。第一部分chemerin、TNF-α在妊娠晚期孕妇外周血及脐血中的表达目的:测定chemerin、TNF-α在妊娠晚期GDM患者血清及脐血中的表达,探讨GDM的发病中,两种脂肪因子的作用及与胰岛素抵抗之间的联系。方法:选择2016年10月至2017年10月在河北省人民医院产科行常规产前检查并入院,因臀位或瘢痕子宫行择期剖宫产分娩的妊娠晚期单胎孕妇,根据75g葡萄糖耐量实验(OGTT)结果,50名入选患者被分为GDM组和正常妊娠组。葡萄糖氧化酶法用于检测空腹血糖;放射免疫法测定空腹胰岛素(FIN)水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);各组均检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)水平;ELISA法测定各组血清中chemerin及TNF-α的水平。结果:1 GDM组和NGT组血脂TG水平分别为(3.37±1.41)mmol/L和(2.59±0.85)mmol/L,两组比较差异显著(P<0.05),而两组中TC、HDL、LDL的水平在统计学上没有显著性差异(P>0.05)。2 GDM组和NGT组妊娠晚期空腹血糖平均水平分别为(4.89±0.61)mmol/L和(4.53±0.61)mmol/L,二者相比差异显著(P<0.01)。3 GDM组FIN及HOMA-IR分别为(14.63±11.80;2.98±1.63),NGT组分别为(10.82±3.38;2.16±0.73),两组比较有显著性差异(P<0.05)。4 GDM组及NGT组血清chemerin水平分别为{(1.61±0.72 vs 1.58±0.84)}ng/ml,两组相比无明显区别(P>0.05);GDM组脐血中chemerin水平为(7.20±2.51)ng/ml,而NGT组中为(5.58±1.50)ng/ml,两组相比,GDM组脐血中chemerin水平显著高于NGT组(P<0.01)。无论NGT组还是GDM组,两组脐血chemerin水平均高于外周血,且差异有显著性(P<0.01)。5 GDM组和NGT组血清中TNF-α水平分别为(130.16±61.75)ng/ml和(84.50±36.96)ng/ml,两组相比,GDM组血清中TNF-α水平明显高于NGT组(P<0.01);GDM组及NGT脐血中TNF-α水平分别为{(78.78±34.68 vs 92.97±43.59)}ng/ml,两组相比无明显差异(P>0.05)。6相关性分析表明:NGT组血清chemerin水平与血清TG水平(r:0.448,P=0.005)及血清VLDL水平(r:0.355,P=0.034)呈正相关。而GDM组血清TNF-α水平与晚期空腹血糖均呈正相关(r=0.335,P=0.012;r=0.395,P=0.005),且与血清chemerin水平呈明显正相关(r:0.344,P=0.015)。GDM组脐血中chemerin与TNF-α水平呈负相关(r=-0.309;P=0.032)。结论:1妊娠晚期NGT组外周血chemerin水平与血脂代谢指标相关,提示chemerin参与正常妊娠期能量代谢调节,维持母体代谢平衡。2 GDM组新生儿脐血中chemerin水平显著高于外周血水平,说明GDM患者新生儿可能处于高炎症状态,推断chemerin与子代并发症有关。3 GDM组TNF-α水平在外周血中显著高于NGT组,支持氧化应激和炎症反应参与GDM的发生这一理论。4妊娠晚期GDM患者血清中chemerin水平与血清TNF-α水平呈正相关,而脐血中二者却负相关,提示两者具有某种联系,而这种联系在成人及胎儿体内并不相同。第二部分Chemerin与TNF-α在胎盘、脐带组织中的表达目的:测定妊娠晚期,GDM孕妇及正常孕妇胎盘组织及脐带组织chemerin、TNF-α mRNA和蛋白的表达,并探讨了两者对GDM胎儿生长发育的影响。方法:选择2016年10月至2017年10月于我院择期剖宫产分娩的孕晚期单胎孕妇GDM组50例,NGT组50例。因臀位或瘢痕子宫行择期剖宫产手术,胎盘娩出后即刻采集胎盘母体面中央及脐带近胎儿端组织。通过荧光定量PCR法(real-time FQ RT-PCR)检测胎盘及脐带组织中chemerin及TNF-α mRNA的表达;免疫印迹法(Wesrern blotting)检测胎盘及脐带组织中chemerin及TNF-α蛋白的表达。结果:1 GDM组Chemerin及TNF-α mRNA在胎盘及脐带组织中分别为(chemerin:2.02±0.49,1.65±0.46;TNF-α:2.32±0.55,1.33±0.43),NGT组Chemerin及TNF-α mRNA在胎盘及脐带组织中分别为(chemerin:0.84±0.30,0.88±0.22;TNF-α:0.77±0.17,0.87±0.22),两组相比,GDM组显著高于NGT组,差异在统计学上有显著性(P<0.05)。2 GDM组胎盘中chemerin的蛋白表达明显高于NGT组(6.71±1.53 vs 2.64±0.59,P<0.01),有统计学差异;而GDM组脐带组织中chemerin的蛋白表达较NGT组虽略有增加,但无显著性(0.86±0.12 vs 0.79±0.15,P=0.355)。3 GDM组胎盘及脐带组织中TNF-α蛋白表达与NGT组相比明显升高(7.14±1.51 vs 1.46±0.36,P<0.01;9.29±1.75 vs 3.37±0.99,P<0.01),差异具有统计学意义。4 GDM组,胎盘组织chemerin mRNA及蛋白表达与新生儿体重无相关性(r=0.412,P=0.127;r=-0.224,P=0.593),与TNF-α mRNA及蛋白的表达分别成正相关(r=0.718,P<0.01;r=0.927,P<0.01)。TNF-α mRNA及蛋白的表达在NGT组和GDM组,均与新生儿体重成正相关(NGT组:r=0.861,P<0.05;r=0.836,P<0.01 GDM组:r=0.800,P<0.05;r=0.912,P<0.01)。结论:1 GDM时胎盘组织及脐带组织均可分泌chemerin及TNF-α。chemerin主要在胎盘局部以自分泌或旁分泌形式起作用,而TNF-α则可作用于全身。2 chemerin可由胎儿自身分泌,GDM孕妇胎儿较高水平的Chemerin,是对胎儿所处的宫内高炎症状态的一种反应,可能是GDM孕妇子代易患糖尿病等代谢疾病的原因之一。