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该研究对那西肽产生菌S.actuosus进行诱变、原生质体再生和Genome shuffling筛选高活力菌种,同时对代谢工程方面进行研究和发酵条件优化.结果显示通过紫外线及亚硝基胍联合诱变获得高产菌株Z<,12>,该菌株进行3次传代试验显示比较稳定.然后对高产菌株Z<,12>发酵条件进行优化,在原培养基中添加2﹪黄豆饼粉、2﹪淀粉、0.1﹪硫酸钠及0.01﹪硫酸铜可以提高发酵单位,另外对补料条件、接种时间等发酵条件进行改变,结果显示种龄采用30小时、初始pH值为7.0、补料采用60﹪的葡萄糖较适合菌种Z<,12>的发酵,菌种Z<,12>相对于出发菌种Z10那西肽提高产量达26.3﹪.2003年提交给杭州汇能生物技术公司生产,中试生产发酵单位最高达2300 μ g/mL,产品占领全国市场.通过原生质体再生获得的菌种Z<,13>活力较高,活力最高达到1600 μ g/mL,并且测定其生化曲线,说明采用原生质体再生方法是选育高产菌种的一条较好的途径.但菌种Z<,13>传至第3代不稳定,应此菌种稳定的工作必须进行.该研究也尝试用genome shuffling方法选育高发酵单位菌种,但结果不理想,可能与筛选菌株及时间较少有关.该研究同时对星点设计在发酵上的应用进行初步探索,星点设计可以通过三维图或者等高线迅速预测发酵影响因素和发酵单位的数值.该研究结果显示:那西肽发酵单位与硫酸钠、硫酸铵和氯化钠之间关系可以用一个明确的二项方程式计算,相关系数达到0.896.产物通过有机溶剂提取,用HPLC鉴定,再用核磁共振确定产物图谱与文献报道一致.