GNA抗体的制备及在转GNA基因大豆检测上的应用

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GNA(lectin from snowdrop)具有多种抗虫功效。到目前为止,全世界已有至少10种植物获得了转GNA基因抗虫植株,它们均表现出一定的抗虫性。但是转基因植物产品是新生事物,食用的历史时间很短,安全性仍然是人们很关心的话题。欧盟委员会颁布实施了转基因食品检测与标注相关的法规,中国农业部从2002年3月20日起也已经要求对转基因产品检测并标注。 目前国际上通用的检测方法主要是DNA检测法和蛋白质检测法。DNA检测法不能够证明蛋白质的有效表达与否,而最终执行抗虫性生物功能的物质,不是DNA,恰恰是蛋白质,对人体的危害也由蛋白质产生,所以,蛋白质检测技术是必须进行的程序。Western blot和ELISA是常用的两种蛋白质检测方法。ELISA法具有灵敏、高效、简便、省时、费用低、可定量检测等优点。 本文通过制备GNA抗体(多抗和单抗),使用ELISA方法对转GNA基因大豆进行检测,力求建立一套简便、快速、高效、灵敏、成本低廉、适用于大量样品检测而且具有较强实际应用价值的有效检测方法,并对使用的检测体系进行了适度评价。 经过认真的实验,本文制备了BALB/c小鼠GNA多抗900 ul,效价为1/200。优化了使用GNA对BALB/c小鼠的免疫程序。掌握了细胞融合和杂交瘤筛选的程序。获得了4株GNA单抗杂交瘤。获得的杂交瘤可以用于制备GNA单抗。初步探讨了转GNA基因大豆的ELISA检测法。
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