论文部分内容阅读
目的:探讨核不均一核糖核蛋白A2B1(hnRNPA2B1)在786-0肾癌细胞生长中的作用,及其调节肾癌细胞生长的可能机制。方法:构建针对hnRNPA2B1基因转录序列的短发夹RNA(shRNA)重组质粒,转染786-0细胞,G418筛选转染重组质粒(包括空质粒)的单克隆细胞株。qRT-PCR检测重组质粒对hnRNPA2B1基因的沉默效果,建立hnRNPA2B1基因特异性低表达的786-0肾癌细胞模型。按照处理因素将癌细胞分成P-shRNA-A2B1组(基因沉默组,转染重组质粒)、P-shRNA-GFP组(空质粒对照组,转染空质粒)、正常786-0组(正常对照组,未转染质粒);MTT比色法检测各组细胞的增殖能力;流式细胞术(FCM)检测各组细胞凋亡率;qRT-PCR检测各组细胞中凋亡因子Bcl-X亚型Bcl-X(S)与Bcl-X(L)表达改变以及Bcl-X(S)/Bcl-X(L)比值变化。结果:1、P-shRNA-A2B1组hnRNPA2B1基因表达量较正常786-0组明显降低(P<0.05),P-shRNA-GFP组hnRNPA2B1基因表达量与正常786-0组无明显差异(P>0.05),成功建立了hnRNPA2B1基因低表达的786-0肾癌细胞株模型;2、与正常786-0组相比,P-shRNA-A2B1组细胞增殖率降低(P<0.05),凋亡率增加(P<0.05),而P-shRNA-GFP组与正常786-0组相比均无明显差异(P>0.05);3、P-shRNA-A2B1组促凋亡因子Bcl-X(S)亚型mRNA表达量以及Bcl-X(S)/Bcl-X(L)比值明显高于正常786-0对照组(P<0.05),P-shRNA-GFP组与正常786-0差异无统计学意义(P>0.05)。结论:hnRNPA2B1基因在786-0肾癌细胞中表达,沉默该基因可以抑制786-0肾癌细胞的增殖,促进癌细胞凋亡,最终抑制癌细胞生长。hnRNPA2B1基因促进肾癌细胞生长的作用与调节凋亡相关因子Bcl-X两个亚型Bcl-X(S)与Bcl-X(L)的表达有关。