目的:本研究旨在建立灵敏、快速、适用于全自动化仪器的sST2管式化学发光免疫分析技术,并初步探讨其临床应用价值。方法:1、HEK 293F细胞瞬时转染pTT5-sST2-his重组表达质粒,进一步应用镍亲和层析纯化方法来获得较高纯度的sST2蛋白。2、采用间接ELISA检测方法进行单克隆抗体的筛选,并通过棋盘法筛选到可用于检测血浆中sST2的单克隆抗体配对,并进行线性范围检测、相关性分析等。3、本研究进一步优化了 sST2管式化学发光检测体系,并初步评价了化学发光检测方法的性能。4、本研究通过建立的sST2管式化学发光检测体系对临床样本进行检测分析,初步评价sST2的临床应用价值。结果:1、本研究获得了高纯度真核表达sST2蛋白,可用于小鼠的免疫和单克隆抗体的筛选。2、本研究筛选到了 54株与sST2抗原具有较强反应性的单克隆抗体,并获得2对高效检测sST2的抗体配对,以此为基础建立sST2管式化学发光检测体系。3、本研究建立的sST2管式化学发光检测体系的检测线性范围为0.2～400 ng/mL,分析灵敏度达到0.07ng/ml,批内CV值小于6%,平均回收率为98.42%,与the Presage（?） ST2 Assay Kit具有较好的相关性,R2=0.936,全程检测时间为30min,实现了 sST2的快速自动化检测。4、心衰患者sST2高于健康对照组（p=0.022）、NYHA为Ⅲ、Ⅳ级的患者sST2高于NYHA分级为Ⅱ级的患者（p<0.05）;心衰患者sST2与NT-proBNP成正相关（p<0.05）;健康对照组中,sST2正常参考区间为≤35.47ng/mL、男性sST2高于女性（p=0.01）;在肾功能不全患者分组中,sST2没有统计学差异（p=0.467）,sST2与肌酐无相关性（p=0.912）;单独检测sST2用于心衰的诊断价值不大;此外,对心衰患者连续监测sST2浓度变化有助于预后判断。结论:1、本研究建立了有效的基于哺乳动物细胞表达系统的sST2分泌性表达方法,获得了较高纯度和免疫原性较强的重组sST2抗原。2、本研究成功制备2对高效检测血浆中sST2的单克隆抗体配对,并以此为基础,初步建立血浆sST2管式化学发光检测方法,实现血浆中sST2的高效自动化检测,可为开展sST2相关的基础研究与临床应用研究及心衰患者诊疗提供实验依据和检测技术。