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猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科(Circoviridae)中的圆环病毒属(Circovirus),其基因组为单股环状DNA,其结构蛋白呈二十面体对称,病毒无囊膜包裹。PCV病毒主要有两个基因型,猪圆环病毒1型(Porcine circovirus type 1,PCV1)和猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2),但在2016年,美国分离出一株新的圆环病毒,基因型有别于PCV1与PCV2,该新基因型的圆环病毒被称为猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type3,PCV3)[1]。但现阶段对养殖业影响最大的仍是PCV2,该病毒又细分为5个亚型,分别是PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d、PCV2e。该病毒单独感染对猪不造成严重疾病,但与其他病原交叉感染时,会加重病猪的病情,造成大量猪只死亡,给养殖业造成巨大损失。近年PCV2优势毒株不断演变,流行趋势愈加复杂。本研究采集了河南部分地区养殖场的病猪组织,利用PCR法进行多种病毒基因组检测,对于检测为PCV2阳性的病料,会进行PCV2病毒的全基因组测序,并进行病毒遗传进化分析。本研究中共检测25批病料,其中阳性病料15批,阳性率达到了60%,本研究共测得13株病毒的全基因组,其中4株为PCV2b亚型,其余均为PCV2d亚型,分析这些毒株出现时间,发现在2016年2017年9月期间,主要流行毒株为PCV2d亚型,但在2017年年末,连续出现了PCV2b亚型,所以预测PCV2优势毒株有重新向PCV2b亚型演变的趋势。卵黄抗体(Immunoglobulin of yolk,IgY)是指从免疫鸡(或禽类)卵黄中提取的针对特定抗原的抗体,是存在于卵黄中的最主要免疫球蛋白,具有较强的特异性,无任何毒副作用,与抗生素相比,IgY具有环境友好型、不引起不良反应、不产生毒性残留物、不引起抗药性等优点,在功能上,与哺乳动物的IgG不同,IgY不与哺乳动物的Fc受体和补体受体作用,不能激活哺乳动物的补体系统,同时,IgY也不与葡萄球菌蛋白A、葡萄球菌蛋白G和类风湿因子等结合,这些差异使得IgY在替代抗生素治疗、诊断和异种器官移植方面有较大的优势。本研究中还研制了特异性抗PCV2的IgY。选取8只健康产蛋鸡,随机分为2组,每组用不同的免疫程序免疫产蛋鸡。每天收集鸡蛋,每周通过翅下静脉采血,获取血清;将收集的鸡蛋通过水稀释-硫酸铵沉淀法与氯仿法两种方法分别纯化IgY,并比较两种方法的优劣。对获取的血清与纯化IgY用ELISA抗体检测试剂盒检测其抗体水平,获取抗体水平变化的数据。结果表明,两种纯化方法中,抗体的纯度接近,无明显差异,其抗体效价检测结果也没有明显区别。但是氯仿法提取的抗体,其特异性更好;两种免疫程序免疫的蛋鸡,其血清抗体的产生与持续时间没有明显的区别,在首免7 d后,几乎检测不到抗体,在第21 d时,抗体水平就以接近峰值,而IgY的效价提升滞后于血清抗体;在免疫程序结束后,IgY的效价可持续一个月不下降。