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鼻气管鸟杆菌(Omithobacterium rhinotracheale, ORT)是一种与多种禽类,特别是鸡的呼吸道疾病相关的革兰氏阴性菌,广泛分布于世界各地,给禽类产业造成了一定的经济损失。对于该菌的致病机制及流行病学尚缺乏系统的研究,特别是我国禽类的感染和流行情况的研究甚少。本研究从不同地区321份患有临床呼吸道疾病的禽类的气管样品中分离到27株的ORT,其中21株(77.8%)在首次接种时即分离到小菌落变异株(small colony variant, SCV),经过连续传代,从中挑选出5株稳定的小菌落变异株及其对应的亲代菌株进行了研究。采用API-20NE进行生化鉴定,结果表明5株ORT小菌落变异株的生化反应均为0020000型,而与之相对应的亲代菌株则出现两种不同生化反应结果：ORT-WT3、ORT-WT13、ORT-WT21和ORT-WT28为0020004型,ORT-WT16为0220004型。五株小菌落变异株及亲代菌株的p-半乳糖苷酶检测结果为阳性,亲代菌株氧化酶实验结果为阳性,而小菌落变异株的结果为阴性。体外培养试验表明,小菌落变异株较其和亲代菌株生长速度慢,迟缓期延长。肉汤培养基中添加5%胎牛血清和2%IsoVitaleXTM添加剂能够促进ORT的生长。药敏试验结果显示,小菌落变异株与亲代菌株对克林霉素、卡那霉素、四环素、氨苄西林、氯霉素、头孢噻肟、多西环素、红霉素和青霉素G药物敏感谱相似,所有的小菌落变异株对诺氟沙星耐药,但亲代菌株敏感。二者对阿莫西林、磺胺甲恶唑、克拉霉素、两性霉素B、头孢呋辛钠和庆大霉素的敏感性有一定程度的差异,ORT小菌落变异株同亲代菌株相比,MIC结果更高,这意味着想要成功对ORT进行治疗,需要考虑到ORT小菌落变异株的耐药型。小菌落变异株和亲代菌株的自溶试验结果显示,所有的小菌落变异株的自溶活性更强,在4h内,OD600值降低约53%,而亲带菌株减低了25%。这可能是因为亲代野毒株细胞壁及细胞间聚集有大量的物质,保护其免受Triton X-100的影响。16S rRNA基因进化树分析结果显示,27株ORT分离株划分为15个单倍型,而且亲代野毒株和其对应的小菌落变异株的所有基因位点同源。这15个单倍型可以分为两个进化枝。进化枝1包含有23个分离株且可以分为3个亚进化枝,而进化枝2只含有4个分离株。五株稳定的小菌落变异株并未表现出独立的进化趋势。小鼠巨噬细胞RAW264.7感染试验表明,ORT-WT28亲代菌株的侵染能力比其小菌落变异株强,但感染后24h和48h,小菌落变异株在细胞内的存活均高于其亲代菌株,而且亲代菌株在48h培养后,呈现出明显的下降趋势,这说明ORT小菌落变异株和其亲代野毒株相比,有着更高的胞内存活率,小菌落变异株可能是ORT的致病性的重要组成部分。