基于核酸适配体和纳米金的凝血酶检测新方法

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第一章:本章简述了蛋白质检测的意义和方法,介绍了核酸适配体的概念、筛选及核酸适配体在蛋白质分析中的研究进展;概述了纳米金的特性及其在生化分析中的应用,同时简要介绍了磁性微珠的性能及其在分离检测中的应用;最后阐述了本论文的立题背景、研究内容及创新之处。  第二章:文章采用化学还原法制备了金纳米粒子,并通过透射电子显微镜(TEM)及紫外可见光谱(UV-vis)对制得的金纳米粒子进行表征。制备了核酸适配体修饰的金纳米粒子,比较了纳米金与核酸适配体修饰的纳米金在不同溶液中的稳定性。  第三章:基于磁性分离和纳米金的光学特性,利用金纳米颗粒标记的核酸适配体和被固定在磁性纳米颗粒上的核酸适配体与凝血酶同时结合,构建一种磁性颗粒/凝血酶/纳米金胶的三明治结构,用比色法实现了对凝血酶的检测。最优条件下,该法对凝血酶的响应线性检测范围为2.7nmol/L~54.4 nmol/L,检测限可以达到2.7 nmol/L。  第四章:利用纳米金标记的核酸适配体与凝血酶结合,使原本均匀分散的纳米金颗粒发生聚集,光学吸收发生变化,通过检测纳米金吸收光谱的变化可实现对凝血酶的检测。此法对凝血酶的响应线性范围为13.6nmol/L~272.5 nmol/L,检出限为13.6 nmol/L。
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