纳米山药多糖的制备及降血糖、降血脂活性的研究

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目的对山药粗多糖的提取工艺进行初步研究,将其制备成纳米山药粗多糖,并考察制剂质量。通过建立体内体外模型,研究纳米山药多糖降血糖、降血脂的作用及机理,为开发糖尿病及高脂血症的天然药物提供了依据。方法采用热水提取和闪式提取工艺分别提取山药粗多糖,水提醇沉法分离山药粗多糖,苯酚-硫酸法测定粗多糖的含量,并进行方法学考察。采用高能球磨法制备纳米山药多糖,用激光粒度分布仪测定纳米山药多糖的粒度分布,SEM观察其表面形态。通过腹腔注射四氧嘧啶诱导糖尿病大鼠模型,连续灌胃给药12d后,测定大鼠空腹血糖、糖耐量、C肽、肝糖原的水平,并记录大鼠给药前后体重、饮水量、饮食量的变化,从而研究纳米山药多糖对四氧嘧啶糖尿病大鼠血糖代谢的影响。通过喂养大鼠4w高脂饲料建立高脂大鼠模型,连续灌胃给药30d后,测定大鼠血清TC、TG、HDL-C及LDL-C的含量,进而考察纳米山药多糖对高脂血症大鼠血脂代谢的影响。采用10-7mol/L浓度的胰岛素持续作用HepG2细胞24h,建立胰岛素抵抗模型,通过葡萄糖氧化酶法测定培养液中葡萄糖含量,用MTT法测定山药多糖对细胞增殖的影响,考察山药多糖对HepG2细胞葡萄糖吸收能力及胰岛素抵抗的影响。结果热水提取和闪式提取工艺提取山药粗多糖得率分别为0.78%、0.53%,含量分别为33.63%、27.38%。方法学研究表明精密度和重复性良好,且山药粗多糖样品在2h内稳定。采用高能球磨法制备出的纳米山药多糖表面圆整,无粘连,平均粒径为520nm,且稳定性良好。大鼠腹腔注射200mg/kg的四氧嘧啶可以成功诱导糖尿病大鼠模型,连续30d喂食大鼠高脂饲料可以成功诱导高脂血症大鼠模型,分别给予模型大鼠50mg/mL和100mg/mL剂量的纳米山药多糖12d和30d后,山药多糖各剂量组可以显著降低四氧嘧啶糖尿病大鼠的血糖值(P<0.05),血糖值分别降低了22.86%、8.85%,改善其糖耐量,提高肝糖原及C肽含量(P<0.05),改善糖尿病大鼠的三多一少症状,并且可以显著降低高脂大鼠血清TG、TC、LDL-C的含量(P<0.05)。山药多糖各剂量组具有明显的抑制a-葡萄糖苷酶活性的作用,其抑制率分别为31.15%、2.49%。10-7mol/L浓度的胰岛素可以成功诱导HepG2细胞胰岛素抵抗模型。与对照组相比,山药多糖各剂量组均不同程度的增加了正常HepG2细胞及胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量(P<0.01)。结论高能球磨法制备的纳米山药多糖安全可靠,在体内吸收加快而具有特殊生物学效应。纳米山药多糖具有明显调节糖代谢,改善糖尿病症状,调节血脂的治疗作用,为纳米山药多糖治疗糖尿病及高脂血症的临床应用提供理论依据。
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